Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (1): 82-85.
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谢茂芳1,2,薛保国1*,吴坤2*
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摘要: 根据NCBI上果胶裂解酶(PL)基因在黑曲霉基因组上的分布特点设计特异引物,通过重组PCR扩增出黑曲霉编码PL的结构基因。将PL基因连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-PL,转化大肠杆菌(E.coli)BL21后,用IPTG进行诱导表达。结果表明,PL基因片段序列全长1 431bp,与已知PL基因(XM001397206.2)核苷酸和氨基酸序列同源性均为99%。表达产物经12%SDS-PAGE电泳,得到了一条大小约为50kD的条带,与预期分子量相符,证明真菌PL基因在E.coli BL21中可以有效表达。
关键词: 黑曲霉, 果胶裂解酶, 重组PCR, 原核表达
谢茂芳,薛保国,吴坤. 黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达[J]. 河南农业科学, 2013, 42(1): 82-85.
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