Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (1): 82-86.
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梁慎1,常高正1,赵卫星1,杨丽荣2,孙虎2,李晓慧1,杨帆1,全鑫2,徐小利1*,薛保国2*
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摘要: 以尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)FO-11-06菌株为受体,采用农杆菌介导的遗传转化方法,实现了农杆菌AGL1(含pATMT1)介导的西瓜枯萎病菌的转化,并研究了转化介质和pH值对转化效率的影响。结果表明:在25℃下,采用乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol/L、农杆菌OD600=0.15、尖孢镰刀菌分生孢子含量为1×106个/mL、pH值为5.1~5.8时可实现T-DNA的插入转化。当转化体系pH值为5.3时,转化效率最高,达到每106个分生孢子产生553个转化子。不同共转化介质对转化效率影响明显,玻璃纸和硝酸纤维素滤膜转化效率较高,每106个分生孢子获得551个和549个转化子,显著高于滤纸。通过转化,获得尖孢镰刀菌西瓜专化型转化子1 989个,对生长速度、菌落颜色和产孢量等性状进行分析,发现有46个性状特异的突变体。研究结果为进一步研究尖孢镰刀菌西瓜专化型的生长发育、致病机制和相关基因的功能奠定了基础。
关键词: 尖孢镰刀菌西瓜专化型, 农杆菌, T-DNA插入转化, 转化效率
梁慎,常高正,赵卫星,杨丽荣,孙虎,李晓慧,杨帆,全鑫,徐小利,薛保国. 农杆菌介导尖孢镰刀菌西瓜专化型转化体系的建立及突变体筛选[J]. 河南农业科学, 2012, 41(1): 82-86.
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