支气管败血波氏杆菌dnt基因的克隆、表达及活性鉴定

赵战勤; 薛云; 裴洁; 王臣; 丁轲; 程相朝

doi:10.3969/j.issn.1004-3268.2010.11.030

河南农业科学 >

2010 , Vol. 39 >Issue 11: 112 - 115

DOI: https://doi.org/10.3969/j.issn.1004-3268.2010.11.030

支气管败血波氏杆菌dnt基因的克隆、表达及活性鉴定

赵战勤 ,
薛云 ,
裴洁 ,
王臣 ,
丁轲 ,
程相朝

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¹河南科技大学动物科技学院动物病原微生物实验室,河南洛阳471003;²湖北省动物疫病预防控制中心,湖北武汉430064

网络出版日期: 2010-11-15

基金资助

国家863计划（2006AA10A206）；；河南科技大学创新培育基金项目（2009CZ0010）

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摘要

通过PCR扩增获得支气管败血波氏杆菌的全长4 395 bpdnt基因,并利用pET-28a/BL21系统对其进行了融合表达。Western-blot检测结果表明,表达产物具有良好的免疫学活性。使用His-band purification kit纯化后,得到纯度为93.2%的融合蛋白HIS6-DNT。在乳鼠皮肤坏死试验中,表达产物HIS6-DNT和天然DNT均能导致乳鼠皮肤产生坏死性病变。在乳鼠皮肤坏死阻断试验中,兔抗HIS6-DNT血清能中和天然DNT,使其失去对乳鼠皮肤的坏死毒性。试验结果表明,重组蛋白具有天然DNT的生物学毒性和免疫原性,所产生的抗体具有中和活性,为DNT的结构和功能研究奠定了基础。

关键词： 支气管败血波氏杆菌; 皮肤坏死毒素; dnt基因; 表达

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赵战勤 , 薛云 , 裴洁 , 王臣 , 丁轲 , 程相朝 . 支气管败血波氏杆菌dnt基因的克隆、表达及活性鉴定[J]. 河南农业科学, 2010 , 39(11) : 112 -115 . DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.11.030

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