H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的表达及纯化

  • 李清州 ,
  • 郝惠芳 ,
  • 王丽 ,
  • 赵绪永 ,
  • 朱礼倩 ,
  • 张丽萍 ,
  • 邓瑞广 ,
  • 张改平
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  • 1河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;2河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002

网络出版日期: 2008-08-15

基金资助

国家“973”计划(2005CB523200)

摘要

利用PCR方法从含禽流感病毒HA基因的质粒T—HA上扩增HA基因,再将其克隆到原核表达载体pET28a中,用E.coli BL21(DE3)原核表达,SDS—PAGE和Western--blot对表达蛋白进行鉴定。Western--blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为60kD,位于包涵体中。包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清特异性反应,具有良好的抗原性。ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV血凝素抗体具有良好的灵敏性。

本文引用格式

李清州 , 郝惠芳 , 王丽 , 赵绪永 , 朱礼倩 , 张丽萍 , 邓瑞广 , 张改平 . H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的表达及纯化[J]. 河南农业科学, 2008 , 37(8) : 127 -130 . DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2008.08.035

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