河南农业科学 ›› 2006, Vol. 35 ›› Issue (3): 38-42,62.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2006.03.011

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黑花生再生体系和遗传转化的初步研究

余云芳1,2;姚伟1,3;李红梅1;段真珍1;何正权1;乐超银1;张昌菊2;梁宏伟1   

  1. 1三峡大学生物技术研究中心,湖北宜昌443002;2三峡大学医学院,湖北宜昌443002;3福建农林大学农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室,福建福州350002
  • 出版日期:2006-03-15 发布日期:2006-03-15
  • 基金资助:
    湖北省教育厅青年项目(Q200513002);国家“863”高新技术计划(2002AA241031)

  • Published:2006-03-15 Online:2006-03-15

摘要: 以黑花生品种黑霸920成熟种胚、幼叶和胚轴为外植体,对黑花生植株再生和遗传转化进行了研究。通过设置一系列不同浓度激素配比的培养基来优化各阶段培养条件,初步建立了高效的黑花生再生体系,即花生种子经75%乙醇表面消毒15min,MS+6-BA2.0mg/L为最优化的种子萌发培养基,MS+2,4-D2.0mg/L为最佳诱导愈伤培养基,幼叶为最佳诱导愈伤组织的外植体,MS+6-BA8mg/L+NAA0.5mg/L+AgNO3 1mg/L为最佳分化培养基,MS+NAA2.0mg/L+6-BA0.2mg/L+活性炭200mg/L为最佳生根培养基。同时确定了愈伤组织和幼苗的卡那霉素筛选压分别为30mg/L和300mg/L。利用农杆菌介导法将含有GUS基因和NPTⅡ基因的植物表达栽体pBI121导入花生组织,在对愈伤组织、幼叶和胚轴的GUS表达检测中均有蓝色斑块出现,证明GUS基因已成功转入到花生细胞中。

关键词: 花生, 组织培养, 农杆菌介导法, GUS检测

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