河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (1): 120-122.

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重组杆状病毒表达H9亚型禽流感HA基因的研究

石  霖1,2,熊永忠2,李晓楠1,赵晓彤1,顾贵波1,谷志大1,邓炜娜3,薛树山1,吴运谱1,王宏燕1,魏 澍1,张雅为1,王  竹1,曹  东1   

  1. 1.辽宁省动物疫病预防控制中心,辽宁 沈阳 110164;2.中国农业科学院 哈尔滨兽医研究所, 黑龙江 哈尔滨 150000;3.第四军医大学 西京医院, 陕西 西安 710000
  • 收稿日期:2013-07-20 出版日期:2014-01-15 发布日期:2014-01-15
  • 作者简介:石霖(1982-),男,黑龙江佳木斯人,兽医师,在读博士研究生,研究方向:禽流感分子诊断学。E-mail:hsyshilin@sohu.com
  • 基金资助:
     辽宁省博士启动基金项目(20121148)

  • Received:2013-07-20 Published:2014-01-15 Online:2014-01-15

摘要: 为研究通过体外表达的方式获得具有生物学活性的禽流感HA蛋白的方法,根据GenBank公布的禽流感H9亚型的基因序列设计引物,扩增出HA基因全长片段,将扩增片段克隆到pFastBacHTa载体上,构建重组杆粒rBacmid-HA,在脂质体介导下转染Sf9细胞制备重组杆状病毒,表达HA蛋白,并通过血凝抑制试验、Westernt-blot、间接免疫荧光试验研究其生物学活性。结果显示,在Sf9细胞中成功表达了HA蛋白,分子量约为65kD,且表达蛋白具有良好的生物学活性。 

关键词: 禽流感, H9亚型, HA基因, 杆状病毒, 表达