河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (7): 57-63.

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松墨天牛ADP核糖基化因子1基因的序列及表达特性分析

陈敬祥,程 杰,林 同*   

  1. 华南农业大学 林学与风景园林学院,广东 广州 510640
  • 收稿日期:2017-01-01 出版日期:2017-07-15 发布日期:2017-07-15
  • 通讯作者: 林 同(1969-),男,黑龙江通河人,教授,博士,主要从事昆虫分子生物学研究。E-mail:lintong@scau.edu.cn
  • 作者简介:陈敬祥(1993-),男,湖北荆州人,在读硕士研究生,研究方向:昆虫分子生物学。E-mail:2441430459@qq.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31470653);广东省自然科学基金项目(2015A030313416)

  • Received:2017-01-01 Published:2017-07-15 Online:2017-07-15

摘要: 为了探讨Ras基因超家族中ADP核糖基化因子1基因(ARF1在昆虫生长发育进程中以及在温度胁迫下的表达特性,以松墨天牛为研究对象,从已构建的cDNA文库中筛选到松墨天牛ARF1基因,命名为MaARF1(GenBank:KY368168),对其进行序列分析以及不同虫态和不同温度胁迫下的表达特性分析。结果显示,MaARF1基因编码区序列长为549 bp,编码182个氨基酸。预测蛋白质二级结构主要由α螺旋与β片层组成,其次是无规则卷曲和β转角。通过DNAMAN软件比对发现,MaARF1与赤拟谷盗ARF1蛋白氨基酸序列完全一致,二者同源性为100%,且存在1个十四酰基化位点(G2)和5个保守域(G1 box—G5 box)。通过RT-qPCR分析表明,MaARF1的表达量与松墨天牛的完全变态发育相关,各虫态不间断表达,幼虫期在2龄幼虫(L2)、5龄幼虫(L5)中表达量较高,蛹化期间(L5—P0)表达量表现为上升趋势,并在第2天蛹(P2)中达到最大值,羽化期间(P10—A0)表达量表现为下降趋势;MaARF1在不同温度胁迫下均有表达,低温与高温都会导致表达量下调,温度越高或越低,表达量下调越显著。因此,MaARF1可能主要影响松墨天牛蛹化和羽化这2个变态发育关键点,从而影响整个变态发育历程,同时其也可能参与了松墨天牛体内依赖温度的Ca2+信号途径。

关键词:  , 松墨天牛,  , ADP核糖基化因子1,  , 温度胁迫,  , 变态发育,  , 表达特性,  , RT-qPCR