鸡胸腺肽β4、β15基因的原核表达及其生物学活性测定

河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (12): 140-143.

鸡胸腺肽β4、β15基因的原核表达及其生物学活性测定

张澍，王燕华，郭保党，冀君，吕慧芳，胡小敏，姚伦广^*

南阳师范学院中英南阳洛桑昆虫生物学联合实验室/河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室，河南南阳473061

收稿日期:2014-07-16 出版日期:2014-12-15 发布日期:2014-12-15
通讯作者: 姚伦广（1974-），男，湖南洞口人，教授，主要从事杆状病毒分子生物学研究。E-mail：lunguang@163.com
作者简介:张澍（1989-），女，河南南阳人，在读硕士研究生，研究方向：生物制药与基因工程疫苗。E-mail:327637545@qq.com
基金资助:

国家自然科学基金项目（31372381）

Received:2014-07-16 Published:2014-12-15 Online:2014-12-15

摘要/Abstract

摘要： 为获得具有生物学活性的鸡胸腺肽β4、β15,根据大肠杆菌密码子偏爱性,设计合成鸡胸腺肽Tβ4、Tβ15基因片段,采用重叠PCR获得完整的Tβ4、Tβ15基因,将其连接到pET-28a(+)载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,经SDS-PAGE鉴定,应用镍柱亲和层析纯化蛋白质,采用E玫瑰花环试验测定其生物学活性。结果显示,成功构建大肠杆菌表达载体pET28a-Tβ4和pET28a-Tβ15,目的蛋白在大肠杆菌中大量可溶性表达,蛋白质分子量大小均为6kD,镍柱亲和层析获得了纯化的蛋白质。E玫瑰花环试验结果显示,重组Tβ4的活力为35.5%,Tβ15的活力为18.7%,均能够明显增强T淋巴细胞的活性。表明Tβ4和Tβ15基因得到成功表达和纯化,并具有良好的生物学活性。

关键词: 胸腺肽&beta, 4基因, 胸腺肽&beta, 15基因, 表达, 纯化, E玫瑰花环试验

张澍，王燕华，郭保党，冀君，吕慧芳，胡小敏，姚伦广. 鸡胸腺肽β4、β15基因的原核表达及其生物学活性测定[J]. 河南农业科学, 2014, 43(12): 140-143.

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