T-2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

河南农业科学 ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (5): 158-162.

T-2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

王坤^1,2，李清州³，胡骁飞¹，李文君²，孙亚宁¹，王方丽¹，职爱民¹，邓瑞广¹，张改平^1*

1.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002；2.河南科技大学食品与生物工程学院，河南洛阳 471003；3.河南省农业科学院农业经济与信息研究中心，河南郑州 450002

收稿日期:2012-11-13 出版日期:2013-05-15 发布日期:2013-05-15
通讯作者: 张改平（1960-），男，河南内黄人，研究员，博士，主要从事动物免疫学及动物病毒分子致病机制研究。E-mail：zhanggaiping2003@yahoo.com.cn
作者简介:王坤（1987-），男，河南南阳人，在读硕士研究生，研究方向：食品安全。E-mail：wangkunbeijing2008@163.com
基金资助:
国家科技支撑计划项目(2011BAK10B01);农业部公益性行业(农业)科研专项(201203040);农业部公益性行业(农业)科研专项(201003008)

Received:2012-11-13 Published:2013-05-15 Online:2013-05-15

摘要/Abstract

摘要： 合成并鉴定T 2毒素人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源T 2毒素多克隆抗血清。采用琥珀酸酐法将T 2毒素活化为T 2HS,T 2HS在碳二亚胺(EDC)作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原T 2 BSA和检测抗原T 2OVA,经鉴定后,分别按30、50μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后1次免疫10d后,断尾采血,制备多抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定其敏感性和特异性。结果表明,免疫的6只小鼠效价均达到了1∶104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,其半数抑制质量浓度(IC50)为324ng/mL,且具有良好的特异性。成功合成了T 2毒素人工抗原,制备了多克隆抗体血清,为T 2毒素单克隆抗体的制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。

关键词: T-2毒素, 人工抗原, 多抗血清, ELISA

王坤，李清州，胡骁飞，李文君，孙亚宁，王方丽，职爱民，邓瑞广，张改平. T-2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备[J]. 河南农业科学, 2013, 42(5): 158-162.

[1]	魏蔷, 李青梅, 金前跃, 宋亚鹏, 白怡霖, 张改平. 鸡减蛋综合征病毒中和性单克隆抗体的制备、鉴定及在双抗体夹心ELISA 中的应用[J]. 河南农业科学, 2024, 53(2): 128-135.
[2]	白静科, 吴彦辉, 牛龙龙, 郝浩浩, 王雪芬, 张晓丽, 李淑君. 河南烟草病毒病田间发生动态及种类监测分析[J]. 河南农业科学, 2022, 51(12): 90-96.
[3]	孟继秋, 胡骁飞, 王耀, 邢云瑞, 曹金博, 陈琳琳, 孙亚宁, 张改平. 6-苄基腺嘌呤人工抗原的合成及鼠源多克隆抗体的制备[J]. 河南农业科学, 2021, 50(5): 157-164.
[4]	王丽, 冯丽丽, 张雨杭, 孙亚宁, 杨继飞, 赵东, 王瑞宁, 李学伍, 郭军庆, 张改平. 猪瘟病毒E^rns/E2融合蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及评价[J]. 河南农业科学, 2021, 50(4): 154-161.
[5]	司艳芳, 李鹏, 郭东光, 孙国鹏, 岳锋, 王选年. 西马特罗多克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立[J]. 河南农业科学, 2020, 49(6): 157-164.
[6]	郭东光, 陈明艳, 朱艳平, 李鹏, 岳锋, 崔芳微, 李文明, 王金海, 王选年. 猪瘟病毒结构蛋白E0抗体间接ELISA检测方法的建立及优化[J]. 河南农业科学, 2019, 48(11): 151-156.
[7]	郉云瑞，孙亚宁，姚静静，王英华，郝慧芳，柴书军，李俊鹏，胡骁飞. T-2毒素完全抗原制备及免疫学检测方法的建立[J]. 河南农业科学, 2018, 47(4): 124-129.
[8]	朱雪雁，葛闻博，何玉琴,史军红，王文芳. 甘加藏羊发情周期不同阶段血浆生殖激素分泌规律[J]. 河南农业科学, 2017, 46(11): 138-143.
[9]	张世伟，赖心田，王士峰，黄静敏，冯荣虎，谭贵良，刘垚，杨国武. 基于免疫分析的杏仁蛋白饮料中杏仁蛋白质定量方法研究[J]. 河南农业科学, 2016, 45(4): 145-149.
[10]	解伟涛，梁跃，乔松林，郝慧芳，郭成留. 2014—2016年河南省猪伪狂犬野毒感染和免疫情况血清学调查[J]. 河南农业科学, 2016, 45(12): 153-156,160.
[11]	高进勇，马超锋. 信阳地区猪传染性胸膜肺炎血清流行病学调查[J]. 河南农业科学, 2016, 45(12): 157-160.
[12]	刘肖，金前跃，郭军庆，王寅彪，张腾，李鹏，陈丽颖，张改平. 猪圆环病毒2型重组Cap蛋白体外稳定性研究[J]. 河南农业科学, 2015, 44(3): 124-127.
[13]	阮涛，孙国鹏，王丽，李鹏，朱艳平，王选年. 新城疫病毒xx08株HN蛋白主要抗原区的原核表达及其在抗体检测中的应用[J]. 河南农业科学, 2015, 44(1): 121-125.
[14]	蔡齐超，胡骁飞，侯玉泽，王耀，殷萌琪，王方雨，邓瑞光，张改平. 苯乙醇胺A人工抗原的制备与鉴定[J]. 河南农业科学, 2014, 43(7): 150-155.
[15]	刘儒彪，胡骁飞，孙亚宁，王方雨，蔡齐超，邓瑞广，张改平，刘玺. 沙拉沙星完全抗原的合成及多克隆抗血清制备[J]. 河南农业科学, 2014, 43(5): 167-171.

T-2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

PDF

可视化

被引次数

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics