玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及其表达载体构建

河南农业科学 ›› 2018, Vol. 47 ›› Issue (5): 16-23.

玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及其表达载体构建

曹路遥¹，周岩^1*，魏琦超¹，陈燕绘¹，陈亚东^1，2，蔺一帆¹，田瑞婷¹

（1.河南科技学院生命科技学院/现代生物育种河南省协同创新中心，河南新乡 453003； 2.河南省华隆生物技术有限公司，河南新乡 453003）

收稿日期:2017-11-16 出版日期:2018-05-15 发布日期:2018-05-15
通讯作者: 周岩（1962-），女，河南新乡人，教授，博士，主要从事植物分子生物学研究。E-mail:yanzhou68@126.com
作者简介:曹路遥（1993-），男，河南许昌人，在读硕士研究生，研究方向：作物生物技术。E-mail:1090076065@qq.com
基金资助:
河南省基础与前沿技术研究计划项目（152300410093）

Received:2017-11-16 Published:2018-05-15 Online:2018-05-15

摘要/Abstract

摘要： 为了克隆磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPCase）的编码基因以用于表达载体的构建，本研究根据已公开的序列信息设计特异性引物，以玉米自交系ZD410的叶片DNA为模板，通过PCR技术成功克隆了pepc基因的全长序列。生物信息学分析发现，该基因完整ORF长度为2 913 bp，编码蛋白质分子质量约为108.179 ku，等电点（PI）为5.73；对其氨基酸序列进行同源性检索分析显示，该蛋白质与其他C4植物的 PEPC 蛋白具有极高的同源性；利用Gateway技术构建含pepc目的基因的表达载体，并通过农杆菌介导的花序浸染法将该基因导入野生型拟南芥。

关键词: 玉米, 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因, 基因克隆, 载体构建, 拟南芥, 遗传转化

曹路遥，周岩，魏琦超，陈燕绘，陈亚东，蔺一帆，田瑞婷. 玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及其表达载体构建[J]. 河南农业科学, 2018, 47(5): 16-23.

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