Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (2): 105-110.
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赵宝磊1,刘运超2,陈玉梅2,姬鹏超2,王聚财1,刘 畅2,杨素珍2,张改平1,2*
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摘要: 为了高效可溶性表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP0、VP1结构蛋白,根据大肠杆菌密码子的偏爱性优化合成VP0和VP1基因片段,并将其克隆到pE-SUMO载体中,构建重组质粒SUMO-VP0和SUMO-VP1,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,并优化诱导温度、时间和IPTG浓度等表达条件。结果显示, SUMO-VP0可溶性蛋白表达的最佳条件为:20 ℃条件下,0.1 mmol/L IPTG诱导表达8 h;SUMO-VP1可溶性蛋白表达的最佳条件为:37 ℃条件下,0.1 mmol/L IPTG诱导表达12 h。 SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明,表达的SUMO-VP0、SUMO-VP1可溶性蛋白能够被抗FMDV的阳性血清识别,具有很好的反应原性。
关键词: 口蹄疫病毒, VP0、VP1结构蛋白, 可溶性表达, SUMO标签
赵宝磊,刘运超,陈玉梅,姬鹏超,王聚财,刘 畅,杨素珍,张改平. O型口蹄疫病毒VP0和VP1蛋白的可溶性表达与反应原性分析[J]. 河南农业科学, 2017, 46(2): 105-110.
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