Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (1): 127-131.
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李青梅1,王 丽1,冯丽丽2,张雨杭3,赵 东1,杨艳艳1,邢广旭1,柴书军1,李赛赛1,张丽萍1,郭军庆1*,张改平1,3,4*
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摘要: 采用差速离心法纯化鸡新城疫病毒(NDV)标准毒株F48E8,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤细胞技术制备抗NDV单克隆抗体,旨在为NDV中和抗原表位分析奠定基础。将NDV感染BHK-21细胞,建立异源免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)的单克隆抗体检测方法,筛选获得14株分泌抗NDV单克隆抗体杂交瘤细胞株,其单克隆抗体腹水IPMA效价均在0.50×10-2~2.56×10-5(F48E8株和LaSota株)。血凝抑制试验(HI)结果表明,单克隆抗体1G6、2C1、4D2、5F2和13A5具有血凝抑制活性,其HI效价在(6~12)log2(F48E8株)和(9~11)log2(LaSota株)。病毒中和试验结果表明,单克隆抗体5F2和13A5对F48E8株和LaSota株均有明显的病毒中和活性,中和效价分别为1∶400~1∶800和1∶25。夹心ELISA结果表明,单克隆抗体5F2识别NDV HN蛋白,13A5识别F蛋白。综上,成功制备了具有中和活性的NDV单克隆抗体(5F2和13A5)。
关键词:  , 鸡新城疫病毒, 单克隆抗体, 免疫过氧化物酶单层细胞试验, 血凝抑制试验, 中和试验, 中和活性
李青梅,王 丽,冯丽丽,张雨杭,赵 东,杨艳艳,邢广旭,柴书军,李赛赛,张丽萍,郭军庆,张改平. 鸡新城疫病毒中和单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 河南农业科学, 2017, 46(1): 127-131.
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