Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (9): 114-119.

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  • Received:2016-02-10 Published:2016-09-15 Online:2016-09-15

口蹄疫病毒VP1蛋白可溶性表达标签筛选

舒静超,李赛赛,申欢欢,郭豫杰*   

  1. 河南农业大学/农业部动物生化与营养重点开放实验室,河南 郑州 450002
  • 通讯作者: 郭豫杰(1978-),女,河南商丘人,讲师,博士,主要从事生物化学研究。E-mail:cngyuj@163.com
  • 作者简介:舒静超(1990-),男,河南安阳人,在读硕士研究生,研究方向:兽医生物技术。E-mail:shujch1995@163.com
  • 基金资助:
    农业部转基因重大专项(2014ZX0801015B)

摘要: 为了提高口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达,根据A型口蹄疫病毒核酸序列设计并合成了口蹄疫病毒VP1片段,将其克隆到pET21b(+)载体上,设计1对通用引物扩增10个融合标签Grifin、GST、NusA、SUMO、Thioredoxin、ProteinG、γcrystallin、ArsC、PpiB、MBP,并分别将扩增的融合标签与VP1连接构建重组质粒,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),0.5 mmol/L IPTG诱导其表达。SDS-PAGE结果表明,MBP、Grifin和GST能够促进口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达,其中MBP与VP1融合表达蛋白可溶部分占60%;Western blot鉴定分析结果显示,小鼠抗His标签单克隆抗体能识别表达的重组蛋白。表明成功表达了具有免疫学活性的融合蛋白MBP-VP1。

关键词: 口蹄疫病毒, VP1蛋白, 可溶性, 融合标签