Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (8): 136-139.

Received:2016-02-20 Published:2016-08-15 Online:2016-08-15

抗鹅α-干扰素单链抗体基因扩增与表达

姚志兰¹，邓祖丽颖²，傅宏庆¹,黄平³，江明香⁴，刘永鑫⁵，王永娟^1*

1.江苏农牧科技职业学院江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州 225300; 2.郑州幼儿师范学校，河南郑州 450000； 3.湖州市安吉县畜牧兽医局，浙江安吉 313000；4.安吉以琳生物科技有限公司，浙江湖州 313000； 5.阜宁县鑫永生态饲养场, 江苏阜宁 224400

通讯作者: 王永娟（1980-），女，江苏海门人，副教授，博士，主要从事动物传染病防治研究。E-mail:43088591@qq.com
作者简介:姚志兰（1979-），女，江苏泰兴人，兽医师，硕士，主要从事动物传染病防治研究。E-mail:1318575080@qq.com
基金资助:
江苏省“六大人才”高峰第十二批培养对象支助项目（10410015002）；江苏省农业科技支撑计划（BE2014380）；江苏农牧科技学院“凤凰人才工程”项目；江苏农牧科技职业学院重点支持项目（NSFZD1405,NSFPT201510，NSFPT201512）

Abstract

摘要： 为制备抗鹅α-干扰素的单链抗体，以抗鹅α-干扰素的杂交瘤细胞株总RNA为模板，RT-PCR 法扩增鹅α-干扰素的抗体轻、重链基因，再采用SOE-PCR法，以编码柔性多肽(Gly4Ser)3为接头，组装出完整的鹅α-干扰素的单链抗体可变区片段（ScFv）基因，并将ScFv基因克隆到pGEMT-Easy载体中进行测序分析，将测序正确的ScFv基因片段克隆入pET-30a载体中进行诱导表达。结果显示，成功组装了ScFv基因，其全长为726 bp，为VH- Linker-VL 结构，其中VH 长357 bp、VL长324 bp，成功表达了ScFv蛋白，大小为 27 ku。

关键词: , 鹅, , &alpha, -干扰素, , 单链抗体, , 测序, , 表达

姚志兰，邓祖丽颖，傅宏庆,黄平，江明香，刘永鑫，王永娟. 抗鹅α-干扰素单链抗体基因扩增与表达[J]. 河南农业科学, 2016, 45(8): 136-139.

抗鹅α-干扰素单链抗体基因扩增与表达

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