Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (4): 122-125.
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刘 芳1,张 冲1,2,王寅彪2,赵 朴2,邓瑞广2,李学伍2*
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摘要: 依据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV) BJ/YT株gD基因设计引物,扩增gD蛋白抗原表位,其设计扩增长度为702 bp,将扩增片段克隆到pMD19-T载体获得pMD19-T-gD。 利用BamHⅠ和Hind Ⅲ限制性内切酶双酶切pMD19-T-gD质粒,进行琼脂糖凝胶电泳并回收酶切片段,将回收片段与原核表达载体pET-28a连接,成功构建了pET-28a-gD表达载体。将表达载体转化感受态细胞Rosetta,IPTG诱导表达后,进行SDS–PAGE电泳,结果显示,在25 ku处出现特异性蛋白质条带。Western blot分析结果表明,表达产物能够被PRV的阳性血清识别。综上,成功克隆并表达了gD蛋白抗原表位,且其表达产物具有较好的生物学活性。
关键词: 猪伪狂犬病病毒,  , gD基因, 抗原表位,  , 蛋白质表达
刘 芳,张 冲,王寅彪,赵 朴,邓瑞广,李学伍. 猪伪狂犬病毒gD蛋白抗原表位的克隆及表达[J]. 河南农业科学, 2016, 45(4): 122-125.
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