Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (3): 141-143,160.
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吴 双1,马丽丽2,朱善元1,陆 辉1*
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摘要: 为制备鼠抗鸭瘟病毒(DPV)UL6基因的多克隆抗体,采用PCR方法扩增出UL6基因,连接原核表达载体pET-32a(+),构建表达质粒pET-UL6,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3),于37 ℃经1.0 mmol/L的IPTG诱导4 h,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况,将目的蛋白免疫Balb/c 小鼠,利用ELISA方法检测特异性抗体效价。结果显示,构建的原核表达质粒经IPTG诱导能正确表达,且表达的重组蛋白能与DPV阳性血清反应,制备的多克隆抗体效价可达1∶16 000。表明,制备的多克隆抗体具有良好的免疫原性,可以用于UL6基因的表达检测。
关键词: 鸭瘟病毒, UL6基因, 原核表达, 多克隆抗体
吴 双,马丽丽,朱善元,陆 辉. 鸭瘟病毒UL6基因的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 河南农业科学, 2016, 45(3): 141-143,160.
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