Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (10): 142-145.

Received:2013-06-08 Published:2013-10-15 Online:2013-10-15

绿色荧光蛋白基因在山羊胎儿成纤维细胞中的表达

楚秋霞¹，王二耀^1*，吴姣²，陈付英¹，王治方¹，辛晓玲¹，施巧婷¹，冯亚杰¹，李文军¹，魏成斌¹，徐照学¹

1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南郑州 450002；2.河南农业大学牧医工程学院，河南郑州 450002

通讯作者: 王二耀（1971-），男，内蒙古呼和浩特人，副研究员，博士，主要从事家畜胚胎工程研究。E-mail：eryaowang@yahoo.com
作者简介:楚秋霞（1984-），女，河南许昌人，助理研究员，硕士，主要从事家畜胚胎工程研究。E-mail：chuqiuxia@163.com
基金资助:
河南省农业科学院基础研究专项资金项目;国家转基因肉羊新品种培育专项(2013ZX08008003-002)

Abstract

摘要： 为建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的山羊胎儿成纤维细胞(gFFC)株,采用组织块贴壁法培养gFFC,QIAGEN转染试剂介导转染gFFC,用G418梯度法筛选阳性细胞株。结果显示:培养的gFFC生长形态正常;24孔培养板中细胞汇合度达70%～80%时,每60μL转染液内含DNA量0.4μg和QIAGEN转染试剂3μL,每孔内加入40μL转染液时能获得最佳转染效果,在G418筛选1个月后获得抗性阳性细胞株。表明EGFP基因在gFFC中成功表达。

关键词: 山羊胎儿成纤维细胞, 转染, EGFP基因, 表达

楚秋霞，王二耀，吴姣，陈付英，王治方，辛晓玲，施巧婷，冯亚杰，李文军，魏成斌，徐照学. 绿色荧光蛋白基因在山羊胎儿成纤维细胞中的表达[J]. 河南农业科学, 2013, 42(10): 142-145.

绿色荧光蛋白基因在山羊胎儿成纤维细胞中的表达

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