Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (3): 149-153.
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刘秀华1,2， 王 执2，徐素娟2*
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摘要： 弧菌素合成酶的A结构域在弧菌素的合成过程中发挥着重要作用。使用DNAStar软件对A结构域的蛋白质二级结构进行预测,截取了多组不同氨基酸长度的A结构域片段。使用PCR方法从霍乱弧菌N16961的基因组中克隆了A结构域基因,通过酶切、连接等方法将其构建到表达载体pET-21b(+)上,并在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达。在30个不同氨基酸长度的A结构域蛋白片段中获得5个可溶性表达的片段;并且通过三步分离纯化的方法获得了一性状良好、均一和高纯度的A结构域蛋白(N861-1410),从而为A结构域蛋白质晶体生长提供了基础。
关键词: 霍乱弧菌, Ａ结构域, 克隆, 表达, 纯化
刘秀华， 王 执，徐素娟. 霍乱弧菌中弧菌素合成酶VibF的A结构域基因的克隆、表达与纯化研究[J]. 河南农业科学, 2012, 41(3): 149-153.
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