Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (3): 142-145.
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刘庆堂1，王 磊1,2，职爱民1， 滕 蔓1，胡骁飞1，孙亚宁1,2，宋春美1,3， 王寅彪1，张改平1*
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摘要： 合成、鉴定了阿莫西林(amoxicillin,AMO)人工抗原,并通过动物免疫法生产了亲和力高、特异性好的鼠源AMO多克隆抗血清。采用碳二亚胺(EDC)法将AMO分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成完全免疫抗原AMO-BSA和检测抗原AMO-OVA,经紫外分光光度法和SDS-PAGE以及动物免疫进行鉴定。结果表明,偶联后的紫外吸收峰与BSA和AMO相比都发生了一定的位移,AMO-BSA在276nm处出现最大吸收峰,BSA的泳动速度大于AMO-BSA。免疫后获得的3只小鼠多抗血清,通过间接竞争ELISA测定,效价可达1×10-4以上,1号小鼠半数抑制浓度(IC50)为573.75ng/mL,敏感性较好。AMO完全人工抗原的合成以及鼠源多克隆抗体血清的制备,为AMO单克隆抗体的制备奠定了基础。
关键词: 阿莫西林, 人工抗原, 合成, 多克隆抗体, 碳二亚胺法
刘庆堂，王 磊，职爱民， 滕 蔓，胡骁飞，孙亚宁，宋春美， 王寅彪，张改平. 碳二亚胺法制备阿莫西林人工抗原及其鉴定[J]. 河南农业科学, 2012, 41(3): 142-145.
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