H5N1禽流感病毒HA基因的重组腺病毒表达载体的构建

  • 王青 ,
  • 胡建和 ,
  • 徐彦召 ,
  • 朱国坡 ,
  • 郑素玲
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  • 1河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;2中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241

网络出版日期: 2010-07-15

基金资助

基金项目:河南省高校杰出科研人才创新工程项目(2006KYCX020)

摘要

采用PCR方法扩增出禽流感病毒HA基因,将其定向插入pAdtrack-CMV腺病毒穿梭质粒中构建pAdtrack-H5,之后将pAdtrack-H5与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在基因工程菌BJ5183中进行同源重组,获得腺病毒质粒pAdeasy-H5,将pAdeasyd-H5经PacⅠ线性化后转染HEK293细胞株,包装出含有HA基因的腺病毒pAd-H5。结果表明:含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-H5和含有目的基因的腺病毒质粒pAdeasy-H5经PCR、双酶切及核苷酸测序鉴定无误。包装成功的腺病毒pAd-H5经绿色荧光蛋白和RT-PCR分析证实,目的基因在该细胞中成功表达。

本文引用格式

王青 , 胡建和 , 徐彦召 , 朱国坡 , 郑素玲 . H5N1禽流感病毒HA基因的重组腺病毒表达载体的构建[J]. 河南农业科学, 2010 , 39(7) : 92 -96 . DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.07.027

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