牡丹ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

河南农业科学 >

2009 , Vol. 38 >Issue 1: 94 - 97

DOI: https://doi.org/10.3969/j.issn.1004-3268.2009.01.027

牡丹ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

施江 ,
高双成 ,
孔祥生 ,
刘素云 ,
郭永新 ,
陈春燕 ,
郁飞燕

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河南科技大学农学院,河南洛阳471003

网络出版日期: 2009-01-15

基金资助

河南科技大学校基金；河南科技大学SRTP项目；洛阳市科技计划项目（0602042A）

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摘要

利用CTAB改良法提取牡丹洛阳红花辩总RNA，通过反转录酶和设计的ACC氧化酶基因特异引物合成709bp目的片段，进行测序和比对，以确定目的片段的正确性。在709bpACC氧化酶基因片段和pBI121植物表达载体上选择合适的酶切位点，进行XbaI和SmaI双酶切。将709bp片段上切下的510bp片段反向插入pBI121植物表达载体35S启动子后面，构建成含510bp牡丹ACC氧化酶基因反义表达载体。最后采用电击法转化进感受态农杆菌GV3101，以备用于花粉管通道法转化牡丹。

关键词： 牡丹; ACC氧化酶; 克隆; 反义表达载体

本文引用格式

施江 , 高双成 , 孔祥生 , 刘素云 , 郭永新 , 陈春燕 , 郁飞燕 . 牡丹ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建[J]. 河南农业科学, 2009 , 38(1) : 94 -97 . DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2009.01.027

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