木质素合成酶COMT基因的PCR扩增条件优化

薛永常; 郭昭

doi:10.3969/j.issn.1004-3268.2008.08.018

河南农业科学 >

2008 , Vol. 37 >Issue 8: 65 - 67,75

DOI: https://doi.org/10.3969/j.issn.1004-3268.2008.08.018

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木质素合成酶COMT基因的PCR扩增条件优化

薛永常 ,
郭昭

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大连工业大学生物与食品工程学院;

网络出版日期: 2008-08-15

基金资助

辽宁省自然科学基金项目(20062146);辽宁省教育厅科研项目(20040091)

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摘要

以2×CTAB法从欧美杨107号嫩叶提取的基因组DNA为试材,建立了木质素合成酶COMT基因的PCR扩增体系。通过对PCR反应的影响因子——模板DNA用量、dNTP浓度、DNA聚合酶量、引物浓度和退火温度进行优化,最终建立了扩增COMT的PCR优化体系为:在20μL的反应体系中,dNTP为2.5 pmol,引物各为5 pmol,模板为5 ng,Red TaqTMDNA聚合酶1.25 U,退火温度为51℃,可以扩增出清晰的扩增带。

关键词： COMT; 优化; 聚合酶链式反应

本文引用格式

薛永常 , 郭昭 . 木质素合成酶COMT基因的PCR扩增条件优化[J]. 河南农业科学, 2008 , 37(8) : 65 -67,75 . DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2008.08.018

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