甘蓝型油菜Δ~(12)-油酸去饱和酶基因RNAi载体的构建

河南农业科学 >

2006 , Vol. 35 >Issue 6: 36

DOI: https://doi.org/10.15933/j.cnki.1004-3268.2006.06.010

甘蓝型油菜Δ~(12)-油酸去饱和酶基因RNAi载体的构建

梁会娟 ,
苗丽娟 ,
曹刚强 ,
田保明 ,
陈占宽

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郑州大学生物工程系,河南省农业科学院生物技术研究所,郑州大学生物工程系,郑州大学生物工程系,河南省农业科学院生物技术研究所河南郑州450001,河南郑州450002,河南郑州450001,河南郑州450001,河南郑州450002

网络出版日期: 2006-06-15

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摘要

通过基因工程手段抑制甘蓝型油菜Δ12-油酸去饱和酶(delta-12 oleate desaturase FAD2)基因的表达,从而使油酸脱饱和产生亚油酸的步骤受阻,达到富集油酸,减少多不饱和脂肪酸含量的最终目的。依据植物RNA干扰的原理和研究中用于构建RNAi载体的基本经验,选择油菜fad2基因片段(510bp)分别以反向和正向的形式插入到油菜napin启动子下游,并在反向和正向插入的基因片段之间即间隔区导入1个来源于豌豆的rbcS-3C基因内含子(83bp)及其剪切位点之前5bp、之后4bp片段。组装完成的fad2RNAi载体转入到植物双元表达载体pCAMBIA3301,植物筛选标记基因采用抗灭生性除草剂PPT的选择基因bar及报告基因gus,从而构建成以甘蓝型油菜fad2基因为靶标的RNAi植物表达载体pCAMBIA3301-fad2i。

关键词： 油菜; 油酸; fad2; RNAi; 载体构建

本文引用格式

梁会娟 , 苗丽娟 , 曹刚强 , 田保明 , 陈占宽 . 甘蓝型油菜Δ~(12)-油酸去饱和酶基因RNAi载体的构建[J]. 河南农业科学, 2006 , 35(6) : 36 . DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2006.06.010

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