黑花生再生体系和遗传转化的初步研究

余云芳; 姚伟; 李红梅; 段真珍; 何正权; 乐超银; 张昌菊; 梁宏伟

doi:10.3969/j.issn.1004-3268.2006.03.011

河南农业科学 >

2006 , Vol. 35 >Issue 3: 38 - 42,62

DOI: https://doi.org/10.3969/j.issn.1004-3268.2006.03.011

黑花生再生体系和遗传转化的初步研究

余云芳 ,
姚伟 ,
李红梅 ,
段真珍 ,
何正权 ,
乐超银 ,
张昌菊 ,
梁宏伟

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¹三峡大学生物技术研究中心,湖北宜昌443002;²三峡大学医学院,湖北宜昌443002;³福建农林大学农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室,福建福州350002

网络出版日期: 2006-03-15

基金资助

湖北省教育厅青年项目（Q200513002）；国家“863”高新技术计划（2002AA241031）

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摘要

以黑花生品种黑霸920成熟种胚、幼叶和胚轴为外植体，对黑花生植株再生和遗传转化进行了研究。通过设置一系列不同浓度激素配比的培养基来优化各阶段培养条件，初步建立了高效的黑花生再生体系，即花生种子经75％乙醇表面消毒15min，MS＋6-BA2．0mg／L为最优化的种子萌发培养基，MS＋2，4-D2．0mg／L为最佳诱导愈伤培养基，幼叶为最佳诱导愈伤组织的外植体，MS＋6-BA8mg／L＋NAA0．5mg／L＋AgNO3 1mg／L为最佳分化培养基，MS＋NAA2．0mg／L＋6-BA0．2mg／L＋活性炭200mg／L为最佳生根培养基。同时确定了愈伤组织和幼苗的卡那霉素筛选压分别为30mg／L和300mg／L。利用农杆菌介导法将含有GUS基因和NPTⅡ基因的植物表达栽体pBI121导入花生组织，在对愈伤组织、幼叶和胚轴的GUS表达检测中均有蓝色斑块出现，证明GUS基因已成功转入到花生细胞中。

关键词： 花生; 组织培养; 农杆菌介导法; GUS检测

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余云芳 , 姚伟 , 李红梅 , 段真珍 , 何正权 , 乐超银 , 张昌菊 , 梁宏伟 . 黑花生再生体系和遗传转化的初步研究[J]. 河南农业科学, 2006 , 35(3) : 38 -42,62 . DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2006.03.011

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