河南农业科学 ›› 2018, Vol. 47 ›› Issue (10): 111-115.

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谷氨酰胺对高温应激奶牛乳腺上皮细胞凋亡及Bcl-2、HSP70表达的影响

张响英1,2,唐现文1   

  1. (1.江苏农牧科技职业学院,江苏 泰州 225300; 2.南京农业大学,江苏 南京 210095)
  • 收稿日期:2018-05-10 出版日期:2018-10-15 发布日期:2018-10-15
  • 作者简介:张响英(1974-),女,山东烟台人,副教授,博士,主要从事动物遗传繁育与生物技术研究。E-mail:724673081@qq.com
  • 基金资助:
    国家科技支撑计划项目(2012BAD12B10)

  • Received:2018-05-10 Published:2018-10-15 Online:2018-10-15

摘要: 为探讨谷氨酰胺预处理抗高温应激损伤的作用,以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,取对数生长期的奶牛乳腺上皮细胞,分为对照组、谷氨酰胺组、高温组、谷氨酰胺+高温组,采用MTT法检测细胞存活率、Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡、荧光定量PCR检测Bcl-2基因和HSP70基因的表达水平、比色法分析Caspase-3活性。结果显示,奶牛乳腺上皮细胞经谷氨酰胺预处理后,HSP70 mRNA表达量极显著增加(P<0.01),提高了热应激状态下细胞的热耐受性和存活力;与高温组相比,谷氨酰胺+高温处理组Bcl-2mRNA表达量在热恢复0、6、12 h分别提高3.23倍(P<0.05)、2.49倍(P<0.05)、1.89倍(P>0.05),Caspase-3活性分别下降68.04%(P<0.01)、40.89%(P<0.05)、52.06%(P<0.01)。综上,谷氨酰胺预处理促进了奶牛乳腺上皮细胞Bcl-2和HSP70表达,缓解了高温应激引起的Caspase-3活性上升,抑制了热应激所致的奶牛乳腺上皮细胞凋亡。

关键词: 奶牛乳腺上皮细胞, 谷氨酰胺, 热应激, HSP70基因, Bcl-2基因, Caspase-3活性