河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (4): 113-117.

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牛瘤胃产纤维二糖磷酸化酶细菌的筛选及产酶条件研究

张青青,樊海妍,徐新慧,张璐璐,陈红歌*
  

  1. 河南农业大学 生命科学学院/农业部农业微生物酶工程重点实验室,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2016-11-10 出版日期:2017-04-15 发布日期:2017-04-15
  • 通讯作者: 陈红歌(1967-),女,河南许昌人,教授,博士,主要从事微生物酶的研究与开发。E-mail:honggeyz@163.com
  • 作者简介:张青青(1991-),女,河南平顶山人,在读硕士研究生,研究方向:微生物酶工程。E-mail:15903645518@163.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31571775)

  • Received:2016-11-10 Published:2017-04-15 Online:2017-04-15

摘要:

为了获得产新型纤维二糖磷酸化酶(CBP)的菌株,利用选择性培养基从牛瘤胃液中逐步分离纯化,筛选能以纤维二糖为唯一碳源生长的菌株,分别检测所筛选菌株的β-葡萄糖苷酶(βG)和CBP活力,并对其纤维二糖的利用方式(水解途径或磷解途径)进行鉴定,获得产CBP的菌株,命名为BY-a。采用形态学观察、生理生化试验,结合16S rDNA序列分析,鉴定菌株BY-a为克雷伯氏菌属(Klebsiella)。对菌种产CBP的温度、时间、最适装液量和溶氧量进行初步优化,结果显示,BY-a菌株在装液量为30 mL(250 mL)、37 ℃振荡培养24 h时,产CBP活力最高。

关键词: 牛瘤胃, 纤维二糖, 纤维二糖磷酸化酶, 产酶条件