河南农业科学 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (5): 66-70.

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金属硫蛋白基因MT1A在大肠杆菌中的自诱导表达条件优化及其抗镉性

王 昭1,2,王 席2,杨 威2,彭 冬2,柳忠玉1,2*   

  1. 1.长江大学/湿地生态与农业利用教育部工程研究中心,湖北 荆州 434025;2.长江大学 生命科学学院, 湖北 荆州 434025
  • 收稿日期:2015-12-24 出版日期:2016-05-15 发布日期:2016-05-15
  • 通讯作者: 柳忠玉(1978-),女,湖北潜江人,讲师,博士,主要从事环境污染与生态修复方面的研究。 E-mail:zyliu2004@126.com
  • 作者简介:王 昭(1991-),男,湖北仙桃人,在读本科生,研究方向:环境生物技术。 E-mail:594226195@qq.com
  • 基金资助:
    长江大学湿地生态与农业利用教育部工程研究中心开放基金项目(KF201511);长江大学大学生创新创业训练计划项目(104892013034)

  • Received:2015-12-24 Published:2016-05-15 Online:2016-05-15

摘要: 为了提高金属硫蛋白基因MT1A的高效表达和对重金属的抗性,以菌体密度、可溶性目的蛋白表达量为评价指标,对工程菌自诱导的培养条件(诱导时间、诱导温度)和培养基组分(蛋白胨、酵母粉、甘油、葡萄糖、乳糖)进行优化,并对其抗镉(Cd)性进行分析。结果表明,最优自诱导培养基组分为2.0%蛋白胨、2.0%酵母粉、0.3%甘油、0.05%葡萄糖、0.3%乳糖;重组菌自诱导表达最优培养条件为37 ℃培养 3 h,然后25 ℃继续培养 13 h,此时菌体密度、可溶性蛋白表达量、可溶性蛋白相对产量均最高,分别比未优化ZYM-5052培养基提高77.7%、94.0%、244.8%。当Cd2+浓度为0.5 mmol/L时,高效表达金属硫蛋白的菌株具有明显的抗Cd活性。

 

关键词: 金属硫蛋白, 可溶性表达, 自诱导, 抗镉性