沙拉沙星完全抗原的合成及多克隆抗血清制备

河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (5): 167-171.

沙拉沙星完全抗原的合成及多克隆抗血清制备

刘儒彪[1]^,2, 胡骁飞², 孙亚宁², 王方雨²,蔡齐超², 邓瑞广², 张改平^2,3*,刘玺^1*

1.河南科技学院食品学院，河南新乡 453003；2. 河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002；3.河南农业大学牧医工程学院，河南郑州 450002

收稿日期:2014-01-08 出版日期:2014-05-15 发布日期:2014-05-15
通讯作者: 张改平（1960-），男，河南内黄人，研究员，中国工程院院士，博士生导师，主要从事动物免疫学及动物病毒分子致病机制和食品快速检测技术研究。E-mail：zhanggaiping2003@163.com 刘玺(1959-)，男，河南商丘人，教授，硕士生导师，主要从事食品安全检测与农产品加工研究。E-mail：lxliuxi@163.com
作者简介:刘儒彪（1987-），男，河南商丘人，在读硕士研究生，研究方向：食品安全检测。E-mail: 458407666@qq.com
基金资助:
国家科技支撑计划项目(2011BAK10B01)；河南省重大科技专项项目(121100110800)；河南省高校科技创新团队支持计划资助(13IRTSTHN006)；公益行业（农业）专项 (201203040)

Received:2014-01-08 Published:2014-05-15 Online:2014-05-15

摘要/Abstract

摘要： 为了制备沙拉沙星(SARA)多克隆抗血清，采用碳二亚胺(EDC)法将SARA分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联，制备了免疫原SARA-BSA、包被原SARA-OVA。经SDS-PAGE电泳与紫外扫描初步判定偶联成功，然后用免疫原SARA-BSA分别按20、50 μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠，共免疫3次，每次间隔3周，于最后1次免疫10 d后断尾采血，制备多克隆抗血清。采用间接ELISA方法测定多克隆抗血清效价，间接竞争ELISA方法测定其敏感性和特异性。结果显示，制备多克隆抗血清效价均达1∶10 000以上，IC50为623.5 ng/mL，且与其他药物交叉反应率低,具有较好的特异性。

关键词: 沙拉沙星, 人工抗原, ELISA, 多抗血清

刘儒彪，胡骁飞，孙亚宁，王方雨，蔡齐超，邓瑞广，张改平，刘玺. 沙拉沙星完全抗原的合成及多克隆抗血清制备[J]. 河南农业科学, 2014, 43(5): 167-171.

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