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    2020年第49卷第2期目次
    2020, 49(2):  0. 
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    综述
    病毒诱导的基因沉默技术在双子叶植物中的应用研究进展
    张琴琴, 纪兆林, 朱峰
    2020, 49(2):  1-8.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.001
    摘要 ( )   PDF (1176KB) ( )  
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    病毒诱导的基因沉默(Virusinduced gene silencing,VIGS)是能够快速鉴定基因功能的反向遗传学重要方法之一,是一种RNA水平转录后的基因沉默现象。因其具有试验周期短、操作方法简单、成本低、效率高、获得表型快以及高通量等优点,被大量运用于植物基因功能研究中。阐述了VIGS技术的作用机制,综述了VIGS技术在茄科、豆科、蔷薇科、葫芦科、锦葵科和菊科等双子叶植物中的应用及存在的问题,对前景进行展望,为进一步拓展VIGS的应用提供参考。
    作物栽培·遗传育种
    有机肥氮替代化肥氮对河套灌区春玉米生长发育、氮素效率及产量的影响
    杨旸, 崔超, 马广全, 杭国庆
    2020, 49(2):  9-16.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.002
    摘要 ( )   PDF (1391KB) ( )  
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    针对河套灌区长期过量施用化肥而较少施用有机肥的现状,探讨了有机肥氮替代化肥氮对春玉米生长发育、氮素效率及产量的影响,为探讨河套灌区化肥氮减量与有机肥氮配合施用的可行性及化肥减量比例提供理论依据。采用田间试验,设置不施氮肥(CK)、农民常规施肥(CF)、减量施肥(TS)、TS基础上有机肥氮替代30%化肥氮(MF)、TS基础上有机肥氮替代50%化肥氮(OF)5种施肥模式,探讨了内蒙古河套灌区有机肥氮替代化肥氮对春玉米生长发育、氮素效率及产量的影响。结果表明,施用氮肥可以加快玉米的生长速度,以有机肥氮替代化肥氮(MF、OF)对玉米生长的促进效果更明显,抽雄期MF、OF处理叶面积指数达到最高,分别较CK、CF、TS处理高60.4%、11.1%、35.6%,60.1%、10.9%、35.3%,成熟期OF处理干物质积累量最高,为CK的2.6倍,并分别比CF、TS、MF处理高45.1%、43.0%、57.7%。相同施氮量下,有机肥氮替代化肥氮比单施化肥氮(TS处理)更能提高玉米的氮素效率及产量,且MF处理提高玉米光合特性的效果较明显。MF、OF处理产量与CF处理没有明显差异,但较CK分别提高162.1%、161.7%,较TS处理分别提高32.6%、32.4%。综合分析,相同施氮量下,有机肥氮替代部分化肥氮能明显提高玉米生长速度、叶面积指数,改善光合性能,提高氮素效率及产量,有机肥氮替代50%化肥氮为内蒙古河套灌区春玉米增产、氮肥增效的合理施肥方式。
    紫叶油菜硫同化还原酶基因APR2的克隆及在拟南芥中的遗传转化
    张宏, 李刚, 韩凤英, 赵福永
    2020, 49(2):  17-26.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.003
    摘要 ( )   PDF (12544KB) ( )  
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    紫叶油菜品系XY-PL是通过甘芥杂交获得的一个高世代重组自交系,其紫叶表型稳定、花青素含量高、主要农艺性状良好,是一个潜在的高花青素育种的中间材料。为探讨XY-PL紫叶表型与硫同化代谢关键酶APR2的关系,采用同源克隆法分别克隆了XY-PL和绿叶油菜品种中双11号(ZS11)的APR2基因,共获得3条差异序列,分别命名为PL-APR2、GL-APR2.1和GL-APR2.2。序列分析表明,它们均由4个外显子和3个内含子组成,其编码产物均具有典型的叶绿体转运肽序列,序列之间的一致性为98.2%~99.1%,在系统进化关系上与十字花科植物来源的APR2亲缘关系最近。相对于GL-APR2.1和GL-APR2.2,PL-APR2在叶绿体转运肽转运功能区存在3个氨基酸残基(51SLK53)缺失,可能影响其前体蛋白的跨膜转运,进而影响硫的同化与利用效率。在拟南芥中过表达结果表明,PL-APR2转基因株系在T0—T2代均未表现出紫叶表型,可能与转化受体材料内存在野生型AtAPR2有关。下一步将采用拟南芥apr2突变体作为遗传转化受体进行继续验证,并将对其叶绿体转运肽转运功能进行深入分析。
    刈割时期和留茬高度对水稻饲草产量、品质及籽粒产量的影响
    彭廷, 王童童, 李玲子, 陈亚蓝, 静莉丽, 王家琪, 王成章, 张静, 滕永忠, 赵全志
    2020, 49(2):  27-33.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.004
    摘要 ( )   PDF (1375KB) ( )  
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    为缓解畜牧业发展所需饲草与粮食生产争地的严峻形势,开发水稻粮饲兼用种植模式,采用裂区设计,设置头季水稻刈割时期(抽穗开花期、灌浆期和蜡熟期)为主区,留茬高度(25 cm、35 cm和45 cm)为副区,研究了头季水稻刈割时期和留茬高度对头季干饲草和青贮饲草产量和品质及再生稻籽粒产量的影响。结果表明,随着头季水稻刈割时间的推迟,头季干饲草和青贮饲草产量均呈逐渐增加的趋势,再生稻籽粒产量呈逐渐减小的趋势;随着头季水稻刈割时留茬高度的增加,头季干饲草和青贮饲草产量均呈逐渐减小的趋势;抽穗开花期刈割留茬高度越低再生稻籽粒产量越高,而灌浆期和蜡熟期刈割留茬高度越高再生稻籽粒产量越高。抽穗开花期刈割头季水稻干饲草品质最优,蜡熟期刈割头季水稻青贮饲料品质最优,均达优质一级标准。综上,该种植方式创新了2种水稻栽培模式:一是以再生稻米为主、优质饲草为辅,在水稻抽穗开花期刈割,25 cm留茬高度可收获优质一级干饲草10.51 t/hm2,再生季可收获稻米10.58 t/hm2;二是以优质饲草为主、再生稻米为辅,在蜡熟期刈割,25 cm留茬高度可收获优质一级青贮饲草34.66 t/hm2,再生季可收获稻米4.21 t/hm2,是实现种植业和养殖业有机融合的新途径。
    谷子NBS-LRR类基因家族全基因组鉴定及表达分析
    李任建, 申哲源, 李旭凯, 韩渊怀, 张宝俊
    2020, 49(2):  34-43.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.005
    摘要 ( )   PDF (12519KB) ( )  
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    对谷子NBS-LRR类家族成员进行鉴定,并对其染色体分布、基因结构、保守基序、系统进化及表达水平进行分析,为NBS-LRR类家族基因在谷子抗病分子育种中的应用奠定基础。结果表明,共获得NBS-LRR类家族基因411个,其中含CN(CC-NBS)结构的基因376个,含CNL(CC-NBS-LRR)结构的基因33个,含TIR(Toll interleukin-1 receptor)结构的基因1个,仅含NBS结构的基因1个。多数NBS-LRR类家族基因定位在8号染色体。在谷子中NBS结构域存在4段保守序列,且该家族在系统进化中被分为3类,基因结构多样,保守基序Motif1结构最保守。有23个谷子NBS-LRR类基因与狗尾草存在共线性,21个与水稻存在共线性,仅1个与拟南芥存在共线性,其中Seita.8G088500和Seita.8G088400被鉴定为水稻抗稻瘟病的高度同源基因。谷子与水稻、拟南芥的共线性基因的Ka/Ks值均小于1;与狗尾草的共线性基因中,Seita.6G014500、Seita.6G023500的Ka/Ks值均大于1。表达谱分析表明,在谷子根和穗中高表达的NBS-LRR类基因数目较多,叶次之,幼芽中最少,表明该家族基因可能在根及穗抗病过程中发挥重要作用。
    施氮量对马铃薯干物质积累特性和产量的影响
    崔亮, KRISTIINA Laanemets, 刘冠求, TERJE Thtjrv, MATI Koppel, 周桦楠, 潘家荃, 万博, 孟令文
    2020, 49(2):  44-51.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.006
    摘要 ( )   PDF (1275KB) ( )  
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    以辽宁省主推马铃薯品种辽薯6号为试验材料,采取膜下滴灌种植模式,在底施氮磷钾(15∶15∶15)复合肥750 kg/hm2的基础上,设置5个追施氮水平(N1:0 kg/hm2;N2:60 kg/hm2;N3:105 kg/hm2;N4:180 kg/hm2;N5:225 kg/hm2),以滴施方式追施,研究施氮量对马铃薯干物质积累特性及产量的影响。结果表明,马铃薯叶、茎的干物质积累量和分配比例均随着施氮量的增加而增加,以N5处理最高。块茎的干物质积累量和分配比例随着施氮量的增加先增加后降低,以N3处理最高。马铃薯的干物质转运量、转移率、平均薯块质量、单株薯块质量、产量均以N3处理最高,显著高于其他处理,其中产量为46.5 t/hm2,分别较N1、N2、N4、N5处理提高92.9%、78.2%、9.7%、18.6%。相关分析表明,马铃薯的干物质积累量、积累速率、转运量、转移率与平均薯块质量、单株薯块质量和产量均呈极显著正相关。说明N3处理通过对马铃薯叶、茎及块茎干物质积累量及分配比例的调控,提高了叶和茎干物质向块茎的转运量和转移率,进而增加了平均薯块质量、单株结薯质量和产量。综上,追施氮量以105 kg/hm2最佳。
    简便烘干在水稻叶片DNA大量提取中的应用
    田孟祥, 宫彦龙, 张时龙, 雷月, 何友勋, 李佳丽, 余本勋, 张大双, 叶永印, 闫志强
    2020, 49(2):  52-57.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.007
    摘要 ( )   PDF (3218KB) ( )  
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    为探索烘干法替代液氮冷冻法研磨水稻叶片提取DNA的可行性,首先比较50 ℃低温烘干法与液氮冷冻法研磨水稻叶片提取DNA的扩增效果,然后进一步分析不同温度(50、60、70、80、90 ℃)烘干水稻叶片研磨提取DNA的扩增效果,筛选最佳的烘干温度。结果表明,水稻叶片在50~70 ℃下烘干磨碎所提取的DNA均能进行有效扩增,以50℃效果最佳,其与液氮冷冻法研磨叶片提取DNA的扩增效果无明显差异。水稻叶片烘干法具有操作简单、费用低廉及实用性强等诸多优点,在DNA大量提取中可较好地替代液氮冷冻法对叶片进行制备,具有一定的推广应用价值。
    有机肥基追比例及施用时期对烤烟上部叶产质量及根系生长的影响
    何孝磊, 苟正贵, 刘大学, 杨胜鱼, 赵启超, 杨胜辉, 吴光斌, 熊茂荣
    2020, 49(2):  58-67.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.008
    摘要 ( )   PDF (4694KB) ( )  
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    为缓解烟草连作造成的土壤营养失衡和上部叶产质量下降等问题,探究烤烟上部叶生产适宜的有机肥施用方法,以有机肥100%作基肥(起垄时施用)为对照(CK),通过2016—2017年田间试验,研究了有机肥不同基追比例(4∶1、3∶2)与不同施用时期(移栽后第20、30天)处理下云烟87根质量、根体积、土壤酶活力及上部叶产质量的差异。结果表明,20%有机肥作追肥于移栽后20 d施用(T1)处理移栽后70 d烟田土壤酶活性较CK显著提高,2016、2017年土壤脲酶活性增幅分别为16.59%、14.17%,磷酸酶活性增幅分别为1.77%、1.73%,另外,T1处理烟株根系发育指标较CK提高显著,移栽后70 d烟株不定根活力在2016、2017年分别提高11.37%、9.76%,根干质量在2016、2017年分别增加30.02%、19.96%,根体积在2016、2017年分别增加32.84%、32.69%。T1处理烤后上部叶外观质量分值、感官评吸质量分值、产量及产值均最高,且显著高于CK。综上所述,T1处理对改善烟田土壤酶活力,促进烟株发育效果最好,其烤后上部烟叶产质量均显著优于CK,故平塘烤烟生产中20%有机肥可作为追肥于移栽后20 d施用,有助于其上部烟叶产质量提升。
    土壤中添加生物炭对盐碱胁迫下绿豆生长的影响
    张圣也, 付东波, 刘慧敏, 王柏, 廖梅芳, 李佐同, 赵长江
    2020, 49(2):  68-73.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.009
    摘要 ( )   PDF (1127KB) ( )  
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    以绿丰二号绿豆品种为试验材料,以不添加生物炭土壤为对照(0%,CK),设置生物炭含量分别占盆栽土壤质量的10%、20%,共3个生物炭梯度处理,采用3种碳酸氢钠碱溶液(0、100、200 mmol/L)进行灌根处理,于开花结荚期取样测定绿豆生长和理化指标,研究盐碱胁迫下施用不同比例生物炭对绿豆生长的影响,为盐碱地的修复、开发和利用以及盐碱地绿豆的优质高产栽培提供依据。结果表明,在不添加生物炭条件下,盐碱胁迫导致绿豆植株生物量、株高、叶面积、叶绿素含量、Fv/Fm和根系形态指标均显著下降,且绿豆植株中Na+含量显著增加,K+、Ca2+、Mg2+含量显著降低。添加生物炭处理对盐碱胁迫下绿豆植株生长和体内离子含量有着积极影响,尤其在生物炭添加比例20%处理下,200 mmol/L碳酸氢钠胁迫处理绿豆地下干质量、地上干质量、株高和叶面积分别增加75.00%、19.72%、54.82%和123.10%,根长、总根表面积、根尖数分别增加57.85%、488.50%、227.83%,而根系平均直径无显著变化。此外,添加生物炭提高了绿豆叶片叶绿素含量和Fv/Fm,同时提高了植株K+、Ca2+、Mg2+含量,降低了Na+含量。可见,添加生物炭可以改善盐碱胁迫下绿豆植株地下根系和地上茎叶形态,改善叶片光合性能和根系功能,从而促进绿豆生物量的积累,为后期产量形成奠定基础。总体而言,20%生物炭处理效果优于10%生物炭处理。
    农业资源与环境
    1.5%苦参•蛇床素水剂在番茄和土壤中的最终残留及消解动态
    陈妍
    2020, 49(2):  74-80.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.010
    摘要 ( )   PDF (1222KB) ( )  
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    采用PSA固相萃取-高效液相色谱(HPLC)法,研究了露地和大棚条件下1.5%苦参•蛇床素水剂在番茄和土壤中的消解动态及最终残留,为番茄栽培中农药的安全使用提供参考。结果表明,2种栽培模式下苦参碱和蛇床子素的消解半衰期分别为5.18~6.70 d(番茄)、7.45~8.08 d(土壤)和1.70~1.99 d(番茄)、2.30~2.67 d(土壤)。距末次施药后1、3、7 d采样,苦参碱在番茄中的残留量为ND~0.427 4 mg/kg(露地)、0.010 2~0.522 8 mg/kg(大棚);蛇床子素在番茄中的残留量为ND~0.388 7 mg/kg(露地)、ND~0.395 2 mg/kg(大棚)。苦参碱和蛇床子素均属易降解农药,二者在大棚番茄和土壤中的消解半衰期均长于其在露地。在相同施药剂量、次数和采收间隔期下,除个别情况外,苦参碱和蛇床子素在大棚番茄和土壤中的最终残留量均高于其在露地的相应值。
    高效钾细菌的筛选鉴定及对植物的促生长效应
    郗蓓蓓, 叶建仁
    2020, 49(2):  81-88.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.011
    摘要 ( )   PDF (4995KB) ( )  
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    为了筛选出解钾活性较强的细菌,缓解土壤缺钾状况,从森林土壤中分离筛选到5株解钾活性较强的钾细菌SK1-7、SK2-3、SK2-7、SK3-3、SK3-10。经形态学、生理生化比较及16S rRNA序列分析,将SK1-7鉴定为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai),SK2-3为黏着剑菌(Ensifer adhaerens),SK2-7为新加坡克雷伯氏菌(Klebsiella singaporensis),SK3-3为黄杆菌(Microbacterium maritypicum),SK3-10为解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)。5株钾细菌在解钾培养基中培养7 d后,发酵滤液中钾离子含量分别为42.70、50.40、49.70、41.50、45.23 μg/mL,且pH值也大幅度降低。5株钾细菌对番茄的促生长试验表明,SK1-7、SK2-3、SK2-7发酵滤液能促进番茄种子发芽率的显著或极显著提高。SK1-7、SK2-3、SK2-7菌株处理番茄植株40 d后,番茄的株高、鲜质量和干质量均有所增加。生物活性差异检测显示,5株钾细菌均能分泌生长素;SK2-7和SK3-10发酵液具有抑菌作用;SK1-7具有分泌蛋白酶能力。
    植物保护
    Evolution and Expression Divergence of the Chitinase Gene Family against Leptosphaeria maculans and Sclerotinia sclerotiorum Infection in Brassica napus
    XU Wen, ZHOU Tengsheng, LU Dandan, AN Sufang, HOU Jinna, LI Genyi
    2020, 49(2):  89-103.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.012
    摘要 ( )   PDF (10116KB) ( )  
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    黑胫病和菌核病是造成世界油菜产量下降的2种主要病害,分别由油菜茎基溃疡病菌和核盘菌引起。几丁质酶基因家族被认为是一类病害相关蛋白质,在植物抵抗病菌和非生物胁迫应答过程中发挥着重要作用。然而,甘蓝型油菜中关于几丁质酶基因家族进化及其应答黑胫病和菌核病的表达研究尚未有报道。本研究在甘蓝型油菜基因组中共鉴定了68个几丁质酶基因,分为5个不同的类,分布在15条染色体上。进化分析表明,甘蓝型油菜中几丁质酶基因家族成员的扩张主要是由片段复制和串联重复所致。此外,利用转录组测序数据分析了甘蓝型油菜几丁质酶基因家族应答2种病菌胁迫的表达谱。结果表明,在2种病菌侵染下,几丁质酶基因家族中有一些成员的表达均被诱导,也存在一些几丁质酶基因家族成员被特异地诱导表达。由此可见,甘蓝型油菜中几丁质酶基因家族不同成员的功能在长期进化过程中发生了分化,在应答不同病害胁迫中发挥特异的作用。
    1株林下参内生拮抗真菌的鉴定及发酵条件优化
    周春元, 许世泉, 闫梅霞, 崔丽丽, 华霜, 王英平
    2020, 49(2):  104-110.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.013
    摘要 ( )   PDF (1667KB) ( )  
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    从健康林下参叶片中分离筛选人参黑斑病内生拮抗真菌,为人参黑斑病生物防治提供优良菌种。釆用组织分离培养法筛选人参黑斑病菌内生拮抗真菌,根据形态特征及基于18S rDNA序列的系统发育分析,对拮抗菌株进行了鉴定,通过单因素及正交试验优化该菌株最适培养基及产生抑菌活性物质的发酵条件。结果表明,从健康林下参叶片分离的内生真菌中,获得1株对人参黑斑病菌具有良好拮抗作用的内生菌株FS-01,经鉴定该内生真菌菌株为球毛壳菌(Chaetomium globosum)。该菌株最佳培养基配方与发酵条件:淀粉1.50%、酵母浸粉1.00%、磷酸氢二钾 0.05%、硫酸镁 0.10%,pH值为7.0,培养温度为30 ℃,接种量为6.0%,培养时间为5 d。筛选获得的林下参内生真菌Chaetomium globosum FS-01对人参黑斑病菌具有显著的拮抗作用,可开发为人参黑斑病的生防菌株。
    园艺
    覆盖少花龙葵秸秆对树番茄幼苗镉积累的影响
    练华山, 李红艳, 林立金
    2020, 49(2):  111-115.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.014
    摘要 ( )   PDF (1207KB) ( )  
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    通过盆栽试验,在覆盖少花龙葵各器官秸秆的人工施镉土壤中种植树番茄幼苗,研究覆盖少花龙葵秸秆对树番茄幼苗生长及镉积累的影响。结果表明,与未覆盖相比,土壤覆盖少花龙葵各器官秸秆均能提高树番茄幼苗的生物量和光合色素含量,降低其根系和地上部分的镉含量。土壤覆盖少花龙葵根系、茎秆和叶片秸秆后,树番茄根系镉含量分别较未覆盖减少25.32%、15.71%和21.73%,地上部分镉含量分别较未覆盖减少13.73%、10.50%和11.76%。此外,土壤覆盖少花龙葵各器官秸秆也提高了树番茄的镉转运系数。覆盖少花龙葵秸秆后,土壤pH值较未覆盖显著提高,但土壤有效态镉含量显著降低。因此,土壤覆盖少花龙葵秸秆能够促进树番茄幼苗的生长,提高其光合色素含量,降低根系及地上部分镉含量,其中,以覆盖少花龙葵根系秸秆效果最佳。
    混合盐胁迫下黄花菜生长和生理特性的变化
    韩志平, 张海霞, 周桂伶, 李侠
    2020, 49(2):  116-122.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.015
    摘要 ( )   PDF (2401KB) ( )  
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    为揭示黄花菜对盐胁迫的生理响应,采用砂培浇灌营养液方法,研究了等浓度NaCl和Ca(NO3)2混合盐胁迫下大同黄花菜生长和一些生理指标的变化。结果表明,随盐胁迫浓度提高(0~250 mmol/L),处理后20 d时,黄花菜各形态指标、生物量和叶片含水量明显降低,根系含水量相对稳定,200、250 mmol/L盐胁迫下有植株死亡;随混合盐胁迫浓度提高,质膜透性、脯氨酸含量在不同处理时间均显著增加,抗坏血酸含量在处理5 d时逐渐降低,处理10 d后出现增加—降低的趋势,可溶性糖含量在处理5 d时逐渐降低,处理10 d后显著降低,可溶性蛋白含量基本不变。表明混合盐胁迫造成黄花菜植株膜脂过氧化加剧,地上部水分亏缺,使植株生长严重受抑,但是黄花菜耐盐性较强,可通过促进抗氧化物质和有机渗调物质合成来减轻盐胁迫伤害。黄花菜植株在150 mmol/L混合盐胁迫下仍可正常生长,超过该浓度,植株生命受到威胁,200 mmol/L是黄花菜的致死盐浓度。
    根区交替灌溉下减施氮肥对葡萄生长、产量及品质的影响
    陈丽楠, 刘秀春, 韩晓日, 孙占祥, 荣传胜
    2020, 49(2):  123-129.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.016
    摘要 ( )   PDF (1394KB) ( )  
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    为了探讨根区交替灌溉与减施氮肥对葡萄产量和品质的影响,以4年生辽峰葡萄为试材,设置常规灌溉(CI)和根区交替灌溉(AI)2种灌溉方式,不施氮(NN,0 kg/hm2纯N)、推荐施氮量(RN,100 kg/hm2纯N)和习惯施氮量(FN,200 kg/hm2纯N)3个氮素水平,分析不同水氮耦合方式对葡萄新梢生长、树体冗余生长量、光合特性以及果实产量、品质的影响。结果表明,灌溉方式与施氮量存在显著的互作效应,以CIFN处理新梢长度最大,分别比AIRN和AIFN处理提高11.9%和6.8%。同一灌溉方式下,施氮处理新梢修剪量高于不施氮肥处理(P<0.01),与CI处理相比,AI处理灌溉方式树体新梢修剪量降低21.1%。与CI处理相比,AI处理叶片净光合速率(氮素处理均值)升高,蒸腾速率降低,叶片瞬时水分利用效率显著提高,且AI与RN耦合后叶片瞬时水分利用率最高,分别比CIRN和CIFN处理提高17.6%和34.0%(P<0.05);AI灌溉方式提高了果实产量、可溶性糖含量和维生素C含量,且与RN耦合糖酸比显著提高。综合考虑不同水氮耦合处理,根区交替灌溉与推荐施氮互作可以调控树体生长,创造良好的光合性状,提高叶片水分利用效率,实现节水减肥,有利于葡萄果实产量和品质的提高。
    郁金香耐盐性鉴定方法研究
    李荣华, 王亚军, 方正, 赵斌
    2020, 49(2):  130-135.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.017
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    为了筛选出适宜的郁金香耐盐性鉴定方法,采用栽培法和叶盘法分别对9个品种郁金香进行耐盐性鉴定。结果表明,栽培法鉴定盐溶液是霍格兰+0.6 mol/L NaCl,鉴定时间为18 d;叶盘法鉴定盐溶液是MS+0.6 mol/L NaCl,鉴定时间为4 d。在2种方法处理下郁金香耐盐性强的品种均为阿德瑞姆、哈库恩,耐盐性弱的品种均为世界之爱、朱迪斯。9个品种郁金香的相对耐盐性顺序一致,其中栽培法耗时长、成本较高、需要大量的人力物力,而叶盘法具有鉴定时间短、操作简单、成本低的特点,可应用于大批量郁金香耐盐品种的筛选。
    畜牧·兽医
    猪瘟病毒Erns蛋白在杆状病毒表达系统中的分泌表达及活性检测
    魏蔷, 白怡霖, 柴书军, 刘运超, 宋亚鹏, 张改平
    2020, 49(2):  136-141.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.018
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    为制备用于ELISA检测猪瘟病毒的Erns蛋白,根据昆虫细胞密码子偏好性对Erns的基因序列进行优化,将优化后的Erns基因插入带有信号肽的表达载体pFastBacl-gp67中;随后将重组质粒pFastBacl-gp67-Erns转化至DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选,挑选白斑,提取重组黏粒Bacmid-Erns;将重组黏粒转染sf21细胞得到杆状病毒,经扩增后得到P3病毒,利用其大量感染细胞,3 d后收取细胞培养上清;通过镍填料纯化得到分泌表达的Erns蛋白,通过SDS-PAGE及Western blot检测分泌蛋白的表达水平、纯化情况,用PNGase F处理分析其糖基化水平,通过ELISA分析其抗原性。结果显示,成功构建了重组质粒pFastBacl-gp67-Erns,蓝白斑筛选获得了重组黏粒Bacmid-Erns,在此基础上获得了重组杆状病毒,利用其感染sf21细胞,成功分泌表达了Erns蛋白,纯化所得Erns蛋白纯度较高,具有较高糖基化修饰水平,且纯化所得Erns蛋白能特异性识别猪瘟阳性血清,其抗原性良好。
    黄连解毒散和黄霉素对不同日龄肉鸡回肠菌群结构的影响
    袁林, 李万利, 杜晨红, 王志祥, 易宝弟, 王明发
    2020, 49(2):  142-149.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.019
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    为了研究饲料中添加黄连解毒散(CPD)和黄霉素(FLA)对肉鸡回肠肠道菌群结构的影响,选取180只1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡,随机分成3组,分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础日粮添加5 mg/kg FLA(FLA组)、基础日粮添加1.25 g/kg CPD(CPD组)。结果表明,随着日龄的增加,各组肉鸡的回肠微生物多样性逐渐下降,其中FLA组和CPD组35日龄时操作分类单元(OTU)丰度显著低于15和25日龄(P<0.05)。与对照组相比,日粮中添加FLA显著降低了35日龄肉鸡回肠菌群中黄杆菌属、链球菌属和拟无枝酸菌属等10个属的相对丰度(P<0.05);添加CPD显著降低了35日龄肉鸡回肠菌群中克雷伯菌属、黄杆菌属和拟无枝酸菌属等6个属的相对丰度(P<0.05)。不同处理组肉鸡回肠微生物群落在代谢途径和蛋白质功能上也存在显著差异。35日龄时,与FLA组相比,CPD组肉鸡回肠菌群信号分子与相互作用功能显著增加(P<0.05),同时转录及细胞支架功能显著降低(P<0.05)。由此可见,肉鸡日粮中添加CPD可以调节回肠菌群结构,与FLA作用相似,且不同微生物群落中功能基因的代谢途径也随日粮而变化。
    山楂和黄芪对围产期奶牛血液生化指标和免疫指标的影响
    刘国林, 陶金忠, 白玲荣, 李向龙, 陈永宏, 张萌, 罗芳, 李亚超, 郭延生
    2020, 49(2):  150-158.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.020
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    为研究山楂和黄芪对围产期奶牛能量负平衡和免疫功能的影响,测定了日粮中添加不同剂量的山楂和黄芪后奶牛血液生化指标和免疫指标的变化。选择2~4胎次健康围产期(产前21 d—产后21 d)荷斯坦奶牛45头,随机分成A组、B组和C组。A组饲喂基础日粮,B组和C组分别在基础日粮中添加100 g/(头•d)和300 g/(头•d)山楂和黄芪(山楂与黄芪1∶1)。分别在产前21 d(-21 d)、产前7 d(-7 d)、分娩当天(0 d)、产后7 d(+7 d)和产后21 d(+21 d)尾静脉采血,制备血浆,测定各组奶牛血液生化指标和免疫指标的变化。结果显示,与A组相比,蛋白质指标方面,+21 d时,B组总蛋白含量极显著升高44.10%,球蛋白含量极显著升高66.16%;钙磷指标方面,+7 d时,B组钙含量极显著升高47.28%,+21 d时,钙含量显著升高41.67%、磷含量极显著升高33.57%;脂肪指标方面,+7 d时,C组非酯化脂肪酸含量显著下降27.16%,+21 d时,B组极显著下降34.38%;能量指标方面,0 d时,B组和C组葡萄糖含量分别显著升高24.49%和23.72%,+21 d时,B组酮体含量显著下降25.93 %;免疫指标方面,-7 d、0 d、+7 d和+21 d时,B组和C组免疫球蛋白G含量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),B组肿瘤坏死因子α含量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。综上,围产期奶牛日粮中添加100 g/(头•d)山楂和黄芪(1∶1)时能调节产后奶牛脂类、蛋白质和钙磷代谢,减轻产后能量负平衡,降低产后酮体水平,提高奶牛的免疫力。
    野大黄散提取物的毒性分析
    田其真, 蔡丙严, 程汉, 郝福星, 黄银云
    2020, 49(2):  159-164.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.021
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    为探讨野大黄散提取物临床应用的安全性,以昆明小鼠为研究对象,进行急性毒性和亚慢性毒性试验。急性毒性试验测定野大黄散提取物的半数致死量(LD50)和最大耐受量(MTD);亚慢性毒性试验分别以2 、10 、20 g/kg 3种剂量的野大黄散提取物,连续对小鼠灌胃35 d,观察小鼠临床表现,计算脏器指数,检测血常规、血清生化、免疫学指标,观察脏器组织病理变化,综合判定野大黄散提取物的毒性。结果显示,急性毒性试验无法测定半数致死量,MTD≥120 g/kg。亚慢性毒性试验,与生理盐水对照组比较,野大黄散提取物10 g/kg和2 g/kg剂量组小鼠的淋巴细胞数、呼吸道与肠道sIgA分泌水平和血清IgG水平显著提高(P<0.05),各给药组心脏、肝脏、脾脏、肾脏等脏器组织无明显病理变化。试验结果表明,野大黄散提取物属无毒物质,是安全性较高的中药制剂。
    农业信息与工程·农产品加工
    不同成熟度雪茄烟叶晾制过程中生物碱含量的变化
    张嘉雯, 卢绍浩, 赵喆, 钟秋, 张瑞娜, 赵铭钦
    2020, 49(2):  165-173.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.022
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    为探究不同成熟度雪茄烟叶晾制过程中生物碱含量的变化规律,以什烟1号为试验材料,研究晾制期间不同成熟度雪茄烟叶9种生物碱含量的变化,并进行了相关分析。结果表明,晾制期间烟碱、降烟碱、新烟草碱、可替宁含量均呈先升高后降低的趋势,麦斯明、2,3′-联吡啶含量呈先下降后上升趋势,假木贼碱、N-甲基假木贼碱含量基本不变。干筋期时,除新烟草碱、麦斯明、N-甲基假木贼碱含量以尚熟处理最低外,其他生物碱含量均以适熟处理最低。随着晾制的进行,各成熟度处理烟碱转化率均呈先升高后下降趋势,整体表现为过熟>尚熟>适熟。相关分析表明,不同成熟度烟叶烟碱、降烟碱、新烟草碱、假木贼碱、N-甲基假木贼碱含量两两之间均呈正相关关系,且适熟处理达到显著水平;新烟草碱含量与麦斯明含量呈负相关但不显著;可替宁含量与新烟草碱、二烯烟碱含量均为正相关,而与N-甲基假木贼碱含量呈负相关但不显著。
    熔融尿素法提取羊毛角蛋白机制
    萨如拉, 赵雪梅, 宮川刚, 棚桥光彦
    2020, 49(2):  174-180.  DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.02.023
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    为了探明羊毛角蛋白在熔融尿素中溶解的原理,首先采用SDS-PAGE电泳法测定了溶解羊毛角蛋白的分子质量。其次分别使用香草醛、香草醇、香草酸、乙酰香草醛、甲酰香草酸、4-乙酰-3-甲酰芥子酸、水杨酰苯胺、3,3-二羟基二苯二硫醚、苯胺、酪氨酸等标准化合物替代羊毛角蛋白中的官能团及化学键,与尿素在150 ℃下反应20 min,经乙酸乙酯分液3次,有机层脱水浓缩,丙酮溶解,GC-MS分析;水层冷冻干燥,乙酰化,浓缩,GC-MS分析。结果显示,溶解羊毛角蛋白的分子质量为75 ku,以较高分子状态存在。醛基脱离,酯键只脱离乙酰基,羧基脱离或者与尿素结合,醇羟基和氨基与尿素结合,肽键、二硫键不断裂。羊毛在熔融尿素中溶解是氢键的断裂、官能团的脱离、尿素向官能团结合等几个主要途径来完成的,羊毛角蛋白的一级结构没有被破坏,仍然以较高分子状态存在。酪氨酸的氨基和羧基均跟尿素反应形成环化结构,才能溶于有机溶剂中,并从GC-MS的分析中能检测。所有标准化合物与尿素反应产物的水层中,既没有原料转变的化合物,也没有原料本身,有必要改善试验方法进行进一步的研究。