河南农业科学

2019年第48卷第10期目次

2019, 48(10): 0.

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大鳞鲃鱼的研究现状及养殖发展前景

朱瑞, 吴莉芳, 李良, 于哲, 邹瑞兴, 祖岫杰

2019, 48(10): 1-5. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.001

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大鳞鲃(Barbus capito)具有适应范围广、生长速度较快、味道鲜美、营养价值高、抗逆性强、耐盐碱等特点，是一种很受市场欢迎的鲤科鱼类。在查阅国内外相关文献的基础上，介绍了大鳞鲃的生物学特性、研究现状及养殖发展前景等方面，旨在为大鳞鲃的健康养殖及中国水产养殖品种结构调整提供参考。

水稻磷高效基因OsPHR2转化小麦及转基因植株的耐低肥能力分析

华夏, 方宇辉, 高崇, 韩留鹏, 胡琳, 李艳

2019, 48(10): 6-12. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.002

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磷素是植物生长和发育所必需的大量元素之一，为获得具有磷高效利用特性的转基因小麦植株，以郑麦7698等6个小麦品种（系）为受体，采用基因枪介导转化法对OsPHR2基因进行了遗传转化，对其阳性转基因后代进行遗传分析，并对高、低肥处理条件下转基因T1植株的产量等性状进行分析。PCR检测结果表明，转OsPHR2基因T0阳性植株有180株；遗传分析结果表明，转OsPHR2基因T116个株系中有15个株系OsPHR2基因分离比符合孟德尔单基因遗传分离规律；高、低肥处理结果表明，低肥条件下OsPHR2基因可显著提高小麦的单株产量，但高肥条件下增产不显著，转OsPHR2基因郑麦1342、郑麦7698的单株产量在低肥条件下均较野生型对照显著增加，增幅分别为11.06%、9.27%，主要得益于千粒质量和穗粒数的增加。

粳稻种质资源苗期耐盐相关性状的SSR标记关联分析

谢菲菲, 田普江, 马帅国, 白天亮, 陈静茹, 张倩, 田蓉蓉, 杨治伟, 田蕾, 李培富

2019, 48(10): 13-22. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.003

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选用均匀分布于水稻12对染色体的38个SSR标记对160份粳稻种质资源进行检测，结合水稻种质资源苗期耐盐性评价，发掘耐盐相关性状的分子标记关联位点，以期为耐盐水稻品种的选育提供优良的中间材料和技术保障。结果表明，各耐盐相关性状间存在一定的相关性。耐盐级别与相对苗高、相对地上部鲜质量、相对根鲜质量均呈极显著正相关，与相对茎粗呈显著正相关，与叶片伤害百分率、相对根冠比均呈极显著负相关。利用38对SSR引物，共检测到192个等位基因，其中有效等位基因109.60个，平均有效等位基因数为2.88个，Shannon’s信息指数和Nei’s遗传多样性指数平均值分别为1.139 4和0.586 9。通过关联分析，共检测到11个与水稻苗期耐盐相关性状关联的SSR位点，分布于水稻1、3、4、7、8、9、10、11、12染色体上，表型贡献率介于4.10%～18.85%，其中，表型贡献率最高的等位变异是与相对地上部鲜质量相关联的RM286-7，增加耐盐级别表型效应最大的等位变异是RM7585-1，表型贡献率为6.80%，载体种质为Bertone。

有机无机复合保水材料对玉米苗期土壤水分及幼苗生长的影响

余高, 陈芬, 谢英荷, 赵晓东, 郑海霞, 谭杰斌

2019, 48(10): 23-29. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.004

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将聚丙烯酰胺（PAM）、凹凸棒土（NA）、腐植酸（FA）和秸秆炭（CB）按不同比例混合组成T1（PAM∶NA∶FA∶CB=4∶3∶2∶1）、T2（PAM∶NA∶FA∶CB=4∶3∶1∶2）、T3（PAM∶NA∶FA∶CB=5∶2∶2∶1）、T4（PAM∶NA∶FA∶CB=5∶2∶1∶2）共4种处理，同时以不施保水材料处理为对照（CK）,研究有机无机复合保水材料对玉米苗期土壤水分及幼苗生长的影响,以期为北方干旱、半干旱区玉米生产中保水剂的合理施用提供科学依据。结果表明，不同保水材料处理的土壤水分累积蒸发率总体上均显著低于CK，具体表现为T4<T3<T2<T1<CK，且各有机无机复合保水材料处理土壤水分累积蒸发率总体上均随着有机无机复合保水材料施用量的增加而降低；土壤含水率及玉米幼苗株高、叶面积、茎粗、干物质积累量均显著高于CK，均表现为T4>T3>T1>T2>CK。当有机无机复合保水材料施用量为0.013～0.053 g/kg时，施用量越高，土壤水分累积蒸发率越低，土壤含水率越高；施用量为0.053 g/kg时，对玉米幼苗长势具有明显的促进作用，此时，玉米幼苗株高、叶面积、茎粗以及干物质积累量均为最佳。总体上，当有机无机复合保水材料施用量为0.053 g/kg时，T4处理可以有效降低土壤水分累积蒸发率，提高玉米苗期的土壤含水率，促进玉米幼苗生长。

高粱TCP基因家族全基因组鉴定及表达分析

郑玲, 白雪婷, 李会云

2019, 48(10): 30-36. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.005

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为了研究高粱TCP（Teosinte branched 1/cycloidea/proliferating cell factors）基因家族在生长发育和逆境胁迫中的作用，利用生物信息学方法对高粱TCP基因家族成员进行鉴定，并对其进行染色体定位、保守结构域、进化树和表达模式分析。结果表明，共鉴定出27个高粱TCP基因，其在9条染色体上呈不均匀分布，并在3、6、9号等染色体上存在明显的基因簇。进化树分析显示，高粱TCP蛋白可被分为ClassⅠ和ClassⅡ 2大类，而ClassⅡ类又可分为CYC/TB1和CIN 2个亚类，ClassⅠ包含10个TCP蛋白， CYC/TB1包含3个TCP蛋白，CIN包含14个TCP蛋白。27个高粱TCP蛋白均有非典型的bHLH（Basichelixloophelix）保守区，其中2个有R结构域。表达模式分析表明，大部分高粱TCP基因在种子、胚、雌蕊、早期花序中表达；PEG处理下，高粱根中大部分TCP基因表达量升高,ABA处理嫩枝中个别基因表达量升高，推测上调表达的高粱TCP基因可能在干旱胁迫响应过程中起重要作用。

间作模式对谷子与绿豆生长和产量的影响

薛仁风, 赵阳, 王英杰, 陈剑, 葛维德

2019, 48(10): 37-40. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.006

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为筛选出适合辽宁省的最佳谷子与绿豆间作模式，比较了谷子与绿豆不同间作模式对谷子和绿豆产量、农艺性状、生理指标及经济效益的影响，为保障东北地区农民收入奠定重要基础。结果表明，谷子与绿豆4∶2间作模式的谷子株高达135.8 cm，茎粗达0.65 cm，茎秆质量为10.1 g，穗长为21.5 cm，单穗质量为18.3 g，总体上均显著高于2∶1间作和单作谷子，间作模式还能够激活谷子抗氧化酶活性；间作绿豆的根长和株高增加，且谷子与绿豆2∶1间作模式大于4∶2间作模式，间作绿豆主茎分枝数、单株荚数、荚长、荚粒数、百粒质量均低于单作绿豆。谷子与绿豆4∶2间作模式的经济效益和利润最高，纯利润可达22 185.93元/hm²，相比单作谷子增加27.1%，相比单作绿豆增加3.95倍。

缓释肥分层底施对夏玉米生长、干物质积累和产量的影响

宫宇, 段巍巍, 王贵彦, 陈宗培, 陈召月, 薛佳欣, 李奔

2019, 48(10): 41-46. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.007

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为了探明缓释肥分层底施模式的作用效果，为简化施肥技术的推广应用提供理论依据，以玉米品种鑫瑞25为试验材料，采用随机区组试验设计，设置缓释肥分层（0～15、15～30 cm土层）底施模式（M1）、普通化肥底施模式（M2）、普通化肥底施+追施模式（M3）3个处理，研究了缓释肥分层底施对玉米群体生长、干物质积累与转运、产量等的影响。结果表明，M2模式夏玉米在生育前期具有较高的群体生长率和净同化率，M1和M3模式夏玉米在生育中后期群体生长率和净同化率较高，灌浆期—成熟期M1模式的群体生长率和净同化率显著高于其他施肥模式。抽雄期之后M1模式的干物质积累量显著高于M2和M3模式。夏玉米营养器官干物质的转运率和对籽粒贡献率均表现为M2模式最高，M1与M3模式相似。M1与M3模式的穗粒数和产量差异不显著，但均显著高于M2模式。M1模式的夏玉米产量分别比M2、M3模式提高13.9%、5.2%。可见，缓释肥分层底施能促进夏玉米生育后期的生长发育，提高夏玉米后期的干物质积累量，通过增加夏玉米的穗粒数提高产量。

玉米成熟期抗旱性综合评价

袁闯, 朱林, 许兴, 王开元

2019, 48(10): 47-53. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.008

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为筛选抗旱玉米品种，以15份玉米品种为试验材料，在重度干旱胁迫和正常灌水条件下测量成熟期株高、茎粗、穗长、穗质量、穗行数、行粒数、穗粗、轴粗、突尖长、百粒质量、籽粒产量，运用相关分析、主成分分析、隶属函数值、聚类分析等方法，对不同玉米品种成熟期抗旱性进行综合评价。结果表明，重度干旱胁迫对玉米株高、茎粗、穗长、穗粒数、穗质量、百粒质量等各项指标均产生极显著影响；相关性分析表明，11项指标之间存在一定相关性；主成分分析表明，5个主成分可代替玉米抗旱性87.27%的原始信息;根据抗旱能力综合评价值（D）进行聚类分析，可将供试玉米品种分为4类：第Ⅰ类为高度抗旱型，包括佰青161和中原单32；第Ⅱ类为抗旱型，包括桂青贮、A18/H237和北16/5996；第Ⅲ类为中度抗旱型,包括C5/A18、佰青131、5178/1519、J112/1528、6522/1522、H14/599-2和H237/1506；第Ⅳ类为敏感型，包括佰青178、J152/1506和A3/A28。

移栽期和采收期对豫中烤烟上六片叶经济性状和品质特性的影响

高真真, 李建华, 杨明坤, 段卫东, 顿松阳, 陈小龙, 何冰, 史宏志

2019, 48(10): 54-63. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.009

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为探究移栽期和采收期对烤烟上六片叶经济性状和质量特色的影响，以主栽烤烟品种中烟100为材料，设计不同移栽期与采收期的栽培试验，对烤烟上六片叶经济性状、感官品质等进行测定并分析。结果表明，移栽期和采收期极显著影响上六片烟叶的经济性状，且二者存在极显著的互作效应，移栽期对产量、产值的影响大于采收期，而采收期对上六片烟叶上等烟比例、单叶质量以及均价影响较大，4月25日—5月5日移栽，产量、产值较高，采收期延迟6、12 d均价差异不显著但显著高于其他处理，且上等烟比例比正常采收分别显著提高10.66%、15.39%。移栽期与上六片烟叶的浓香型特色密切相关，移栽期不晚于5月5日有利于烤烟上六片叶浓香型特征的彰显，4月15日—5月5日移栽时，随移栽期延迟，上六片烟叶的钾氯比增加，燃烧性较好，中性致香气成分含量均在4月25日—5月5日较高；采收期对上六片烟叶质量的影响较大，采收期延迟，上六片烟叶的蛋白质含量、淀粉含量、糖碱比下降，且在延迟12 d采收时趋于适宜值，上六片烟叶的感官品质整体均呈升高趋势，以延迟12 d采收质量最佳，中性致香成分总量整体表现为显著增加。综合分析，移栽期为4月25日—5月5日、延迟采收6～12 d时，上六片烟叶的经济性状表现较好，浓香型特征明显，品质较优。

硫化氢对大豆铝胁迫耐受性的增强作用

刘文文, 纪芳, 王华华

2019, 48(10): 64-69. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.010

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铝毒害是酸性土壤地区制约农作物生产的主要逆境因子。为明确作物抵抗铝毒害的机制，以大豆为试验材料，研究了新型植物气体信号分子硫化氢（H₂S）在铝胁迫耐受性中的调节作用。结果显示，铝胁迫处理诱导大豆根尖H₂S的产生。添加外源H₂S供体处理显著缓解了铝胁迫诱导的根伸长受抑，以及根尖铝含量、根尖细胞死亡率、根尖丙二醛和活性氧（H₂O₂和O₂·）含量升高，而添加H₂S合成抑制剂处理则产生了相反的效应，加重了铝胁迫对大豆的伤害；进一步研究显示，铝胁迫下添加H₂S供体处理增强了根尖抗氧化酶（APX、CAT、POD、SOD）的活性，而添加H₂S合成抑制剂处理则抑制了抗氧化酶活性的增强。表明铝胁迫下H₂S通过提高根尖抗氧化能力来清除活性氧的过量积累，缓解铝胁迫对根伸长的抑制。

菌株Enterobactersp.降解除草剂阿特拉津产物测定及降解基因克隆

刘丹丹, 孙宛玉, 刘畅, 马浩珂, 王瑞娇, 隋宇凡

2019, 48(10): 70-76. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.011

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为解析除草剂阿特拉津的生物降解过程，采用液相色谱与质谱联用技术对菌株Enterobacter sp.降解阿特拉津的产物进行检测，通过PCR扩增技术克隆降解基因，并利用GO功能富集分析对降解基因功能进行检测。在降解产物中先后检测出羟基阿特拉津、氰尿酸和尿素组分，克隆出降解基因L465-RS09425、L465-RS10465、L465-RS12445、L465-RS09100、L465-RS12200和UreA。初步推测菌株Enterobacter sp.在降解基因的作用下，经脱氯、脱烷基、脱氨基、环裂解、脱羧和脲基甲酸水解等过程，将阿特拉津逐步矿化。

西藏热泉1株产纤维素酶真菌的鉴定及产酶条件优化

卢雨欣, 赵航轲, 唐小飞, 刘开辉, 邓百万, 丁小维

2019, 48(10): 77-83. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.012

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为深化嗜热纤维素酶资源的开发利用，从西藏尼木热泉分离得到1株产纤维素酶嗜热真菌THN8，根据该菌株在刚果红培养基上产生的透明圈大小，初步判断其产纤维素酶能力。通过形态学和ITS序列分析,鉴定其为Melanocarpus albomyces。在单因素试验基础上采用正交试验确定菌株THN8产纤维素酶的最佳培养基配方及发酵条件，最终获得该菌株产纤维素酶的最佳培养基配方为乳糖92.0 g/L、(NH₄)₂SO₄6.0 g/L、K₂HPO4 3.0 g/L、MgSO₄·7H₂O 0.55 g/L，最佳发酵条件为发酵温度58℃、起始pH值5.5、发酵时间4 d，在此条件下菌株THN8的纤维素酶活力达到28.1 U/mL。试验分离出的产纤维素酶嗜热真菌在降解利用纤维素类农业废弃物方面具有重要作用。

血散薯内生真菌的分离鉴定及其抗菌活性研究

颜桢灵, 李国萍, 骆海玉, 陆保屹, 梁春霞, 邓业成, 邓志勇

2019, 48(10): 84-92. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.013

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从血散薯（Stephania dielsiana Y.C.Wu）中寻找活性内生真菌，为血散薯植物资源的保护及活性天然产物的开发提供依据，对其茎、叶中内生真菌进行分离鉴定，并研究其抗菌活性。结果表明，从血散薯茎、叶中共分离得到38株内生真菌，其中31株经形态学结合分子生物学的方法鉴定表明，其归为14个不同的属，包括链格孢属（Alternaria）、炭团菌属 (Hypoxylon)、枝孢属（Cladosporium）、茎点霉属（Phoma）、镰刀属(Fusarium)、Stagonosporopsis、Ascomycete、毛壳菌属（Chaetomium）、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis）、弯孢霉属（Curvularia）、短梗霉属(Aureobasidium)、Annulohypoxylon、小光壳属(Leptosphaerulina)、刺盘孢属（Colletotrichum）。其中，优势属为链格孢属和茎点霉属。基于前期对峙拮抗预试验结果，选取14株内生真菌进行发酵培养，并测定其对9种植物病原真菌和10种动物病原细菌的抗菌活性。结果表明，内生真菌发酵产物粗提物对供试病原菌具有不同程度的抑制作用。其中，7株内生真菌（叶-8、Y-66、YB-12、J-12、J-34、J-36、J-55）的粗提物对5株或5株以上供试植物病原真菌具有明显抗菌活性。叶-8、J-12分别对玉米大斑病菌、金橘砂皮病菌表现出最佳的抗菌活性，EC₅₀值分别为0.063 1、0.006 2 mg/mL；J-34对甘蓝黑斑病菌、甘蔗凤梨病菌表现出最佳的抗菌活性，EC₅₀值分别为0.018 1、0.004 2 mg/mL。10株内生真菌的粗提物对金黄色葡萄球菌均具有抑制作用，MIC值介于0.500～10.000 mg/mL，4株内生真菌的粗提物对大肠杆菌具有抗菌活性，MIC值介于0.156～4.000 mg/mL。上述结果表明，血散薯茎叶中存在丰富的内生真菌资源，且其次生代谢产物具有广谱抗菌活性。

一种水稻穗腐病新病原的鉴定

陈利军, 王春生, 田雪亮, 智亚楠, 刘焱琨, 卫云飞

2019, 48(10): 93-98. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.014

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水稻穗腐病在我国的发生危害逐年加重，在对河南省信阳市水稻穗腐病的调查中，发现部分发生穗腐病水稻谷粒外颖开裂，外露籽粒伴有蓝绿色霉层，有别于其他病原菌引起的穗腐病症状，为了解引起该病害的病原真菌及其特性，对其进行了研究。通过病样标本室内分离，获得分离物，并对其进行致病性测定、形态学鉴定和多基因系统发育分析。结果表明，分离得到的菌株R1形态学特征与草酸青霉（Penicillium oxalicum）一致，在结合ITS、BenA和CaM序列构建的系统发育树中，菌株R1和草酸青霉处于同一分支，支持率为100%，故将此菌株鉴定为草酸青霉。致病性测定表明，草酸青霉为水稻穗腐病新病原菌。

生物菌剂LZ-1对苹果枝干轮纹病的田间防效研究

张林尧, 孟祥龙, 王午可, 任红敏, 胡同乐, 曹克强

2019, 48(10): 99-104. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.015

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为了寻求新的防治苹果枝干轮纹病药剂和其使用技术，对自主研发的保护性生物菌剂LZ-1进行了田间防治效果研究。结果表明，生物菌剂LZ-1能有效抑制苹果树树体病瘤数增加，对已发生枝干轮纹病的树体具有较高的防治效果，最高防效可达89.93%，与甲基硫菌灵化学涂剂处于同一水平。在涂药时间方面，3—5月涂抹生物菌剂LZ-1对苹果枝干轮纹病均有较好的田间防效，该时期为田间施药的关键时期。生物菌剂LZ-1在苹果树枝条上的有效附着期达60 d，在主干上的有效附着期可达6个月。施用生物菌剂LZ-1可以减少化学药剂的使用量，达到减药目的。

不同育苗基质对辣椒幼苗生长的影响

陈芬, 余高, 侯建伟, 谭杰斌, 王小军

2019, 48(10): 105-111. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.016

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以黔北地区资源丰富的农业有机废弃物和珍珠岩为基质原料，筛选适合辣椒种植的育苗基质。将老糠灰、珍珠岩以及腐熟后的有机物料A和有机物料B按不同比例混合组成8种处理［V(有机物料A）∶V(有机物料B）∶V(老糠灰)∶V(珍珠岩)分别为1∶4∶5∶0（T1）、2∶3∶4∶1（T2）、3∶3∶3∶1（T3）、4∶3∶2∶1（T4）、4∶4∶1∶1（T5）、3∶4∶2∶1（T6）、3∶2∶4∶1（T7）、4∶1∶5∶0（T8）］，以菜园土为对照（CK），对辣椒品种湘辣12号进行穴盘育苗试验，研究不同处理对辣椒幼苗生长的影响。结果表明，除T1处理的水气比和CK的容重不在理想基质的要求范围内，其余处理均能满足辣椒育苗要求。除T1处理的出苗率和成苗率低于CK外，其余7种处理的出苗率和成苗率均高于CK，其中，出苗率比CK提高12.25%～36.79%，成苗率比CK提高12.88%～33.67%。不同育苗基质处理的辣椒幼苗形态指标优于CK（T1处理除外），其中，T3处理的辣椒幼苗株高、茎粗、单株鲜质量、根冠比、壮苗指数以及G值最优。T3处理能够有效地促进辣椒幼苗的生长，可以作为育苗基质应用于辣椒育苗。

水肥耦合对苹果幼树生长及光合特性的影响

周罕觅, 牛晓丽, 燕辉, 赵龙, 赵娜, 向友珍

2019, 48(10): 112-119. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.017

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在滴灌条件下，以2年生桶栽红富士苹果幼树为试验材料，设供水和施肥2个因素，供水设4个水平（充分供水W₁、轻度亏缺W₂、中度亏缺W₃和严重亏缺W₄，其灌水上下限分别为75%~90%、65%~80%、55%~70%和45%~60%田间持水量），施肥设3个水平（高肥F₁、中肥F₂和低肥F₃，其N、P₂O₅、K₂O质量分数分别为0.6、0.2、0.2 g/kg，0.4、0.2、0.2 g/kg和0.2、0.2、0.2 g/kg），研究水肥耦合对苹果幼树生长状况、光合生理特性以及水分利用效率的影响。结果表明,对比F3W4处理，F₁W₁处理植株生长量和叶面积分别提高85.2%和74.5%，F₁W₂处理植株生长量和叶面积分别提高98.7%和87.3%，这说明高肥和轻度水分亏缺水肥组合（F₁W₂处理），最有利于苹果幼树植株和叶面积的生长。水分利用效率的最大值均出现在F₁W₂处理，萌芽开花期、新稍生长期、坐果膨大期和成熟期分别为3.49、3.84、4.37、3.90 mmol/mol，与高水高肥的F₁W₁处理相比，虽然各生育时期净光合速率分别减少1.9%、7.2%、6.8%、2.1%，但水分利用效率分别提高5.8%、6.7%、4.5%、3.2%，这说明适度的水分亏缺可以提高苹果幼树的水分利用效率。不同水肥耦合处理下苹果幼树净光合速率和蒸腾速率差异最大值均发生在坐果膨大期，这说明苹果幼树坐果膨大期为需水需肥的最关键时期，此时期合理的水肥调控可促进苹果幼树的生长。

河南省葡萄产业现状及发展趋势

吕中伟, 张柯, 王鹏, 娄玉穗, 樊红杰, 吴文莹, 张晓锋

2019, 48(10): 120-126. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.018

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为精准把握河南省葡萄产业发展状况，从生产现状（产量、面积、区域分布、品种结构、产值、生产组织形式、加工情况）、市场状况（市场需求、供应品种、价格走势、市场预测）、主要问题和对策、产业发展趋势方面入手进行全面调查和分析。结果表明，近几年来，河南省葡萄产量和面积持续上升，种植区域遍布河南省各市县，栽培模式及标准化管理技术等方面都取得了较大的发展。但不可忽略的是，河南省葡萄产业仍存在诸多问题，包括区划不合理，品种结构较为单一，规模化和标准化程度不高，市场竞争力弱，种植区域分散，产业集中不明显，劳动力紧缺等。只有坚持“品种市场化、生产标准化、管理省工化、资源节约化、果品安全化”原则，注重品牌发展，力争三产融合，才能充分发挥河南省的区域优势，全面推进果品生产由传统“数量型效益”向“质量型效益”转变，推动河南省葡萄产业健康、可持续发展。

不同耐热三色堇材料HSP70基因克隆及热胁迫下的表达分析

牛杨莉, 朱小佩, 杨亚萍, 葛晓敏, 杜晓华, 刘会超

2019, 48(10): 127-132. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.019

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以三色堇耐热材料DFM-16和热敏材料08H为试材，采用PCR技术扩增到VtHSP70基因的cDNA和gDNA序列，通过real-time PCR技术分析了该基因在热胁迫下的表达。结果表明，2种材料中的VtHSP70 cDNA序列长度和开放阅读框长度相同，编码649个氨基酸，氨基酸序列相似性为98.61%。2个材料中的VtHSP70 gDNA结构相似，均包含1个内含子。同源比对和系统进化树表明，VtHSP70基因与拟南芥和水稻中胞质HSP70基因同源性较高。42 ℃热激处理0、1、2、6、12 h后，2种材料中VtHSP70基因表达量都明显上升，但耐热材料DFM-16的升高幅度显著高于热敏材料08H。

猪伪狂犬病毒gE蛋白的酵母表达及其单克隆抗体的筛选

王垚, 金前跃, 周稳, 李旭锋, 柴永笑, 丁培阳, 陈晓, 邢云瑞, 李艳华, 郭军庆, 张改平

2019, 48(10): 133-139. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.020

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为获得具有生物学活性的猪伪狂犬病毒（PRV）gE蛋白及其特异性单克隆抗体，利用电转技术将pPICZαA-gE重组质粒转入毕赤酵母X-33并筛选出阳性克隆，通过SDS-PAGE、Western blot鉴定筛选出PRV gE蛋白表达菌株。通过诱导表达获得gE分泌蛋白，并利用Ni柱进行纯化，应用Western blot、Dot blot、ELISA方法对纯化蛋白进行活性鉴定。同时将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠，细胞融合后通过免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）筛选单克隆抗体，并对单克隆抗体进行了反应性测定、效价测定及亚型鉴定。结果显示，PRV gE蛋白在毕赤酵母中成功表达，并获得了纯化蛋白，纯度达90%以上，且具有良好的生物学活性，与PRV阳性血清反应性良好；筛选到4株敏感性强、特异性良好的gE单克隆抗体，均可同时特异识别PRV gE蛋白及病毒，分别命名为2F10、4C10、9E1、10C3。综上，用酵母系统成功表达了PRV gE蛋白，并筛选到4株针对PRV gE蛋白的单克隆抗体。

1株赛鸽新城疫强毒株的致病特性及分子特征分析

李珮瑶, 高晶萍, 田勇, 王存连, 徐明举, 利凯, 李军, 张瑞华, 兰金苹, 徐彤

2019, 48(10): 140-146. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.021

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为了解赛鸽群中新城疫流行毒株的分子遗传特征及变异情况，从河北省疑似赛鸽新城疫病例中采集病料，常规处理后接种SPF鸡胚，经血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HI）鉴定病毒，并对分离毒株进行致病性试验、毒力测定，采用RT-PCR方法扩增F基因，并与其他不同种属新城疫毒株进行遗传进化发育分析和氨基酸序列同源性分析。结果显示，从病料中分离到1株新城疫病毒（命名为HB株），致病性试验产生与发病鸽相似的临床症状和剖检变化；其鸡胚平均死亡时间（MDT）、1日龄雏鸡脑内致病指数（ICPI）和6周龄雏鸡静脉致病指数（IVPI）分别为52.8 h、1.78和2.59，表明HB株新城疫病毒为强毒株；HB株F基因碱基序列包含1个大小为1 662 bp的完整开放阅读框，基因分型结果显示，HB株属于基因型Ⅵ型。根据遗传进化发育关系和同源性分析结果发现，HB株与pi/CH/LGD/110208、dove/Italy/2736/00、Q-GB 506/97等毒株核苷酸序列相似性和氨基酸同源性较高，尤其与pigeon/Qinghai/1344/2017毒株亲缘关系最近，分别达98.45%和99.5%；与目前使用的传统新城疫疫苗毒株LaSota、B1、V4、Mukteswar株等遗传关系较远;F蛋白裂解位点氨基酸序列为¹¹²R-R-Q-K-R-F¹¹⁷，符合强毒株特征。以上结果表明，HB株为强毒株且与目前广泛使用的新城疫疫苗毒株遗传关系较远。

6种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用

刘云, 朱善元, 龚祝南, 秦枫, 夏文龙, 吴双, 吴晓洁

2019, 48(10): 147-154. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.022

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为研究荆芥、委陵菜、啤酒花、翻白草、百部和虎杖6种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用，建立了Marc-145细胞模型，在研究其对Marc-145细胞最大安全质量浓度的基础上，结合细胞形态观察和MTT法，对PRRSV进行阻断、抑制、灭活3种作用方式的测定。结果显示，荆芥、委陵菜、啤酒花、翻白草、百部和虎杖对Marc-145细胞的最大安全质量浓度分别为0.25 mg/mL、1.25 mg/mL、0.63 mg/mL、0.31 mg/mL、1.56 mg/mL和0.47 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中，从细胞形态观察发现，委陵菜和虎杖药物组均未出现明显的细胞病变，其余4种药物组都出现了不同程度的细胞病变；从对PRRSV的抑制率来看，荆芥对PRRSV的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为80.6%、52.2%和56.5%，委陵菜3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为115.8%、93.0%和125.4%，啤酒花3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为61.5%、32.0%和82.4%，翻白草3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为15.6%、129.4%和57.7%，百部3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为120.2%、61.8%和71.9%，虎杖3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为110.4%、94.3%和130.8%。综合细胞形态观察和抑制率结果，委陵菜和虎杖抗PRRSV的效果最好，其次是荆芥和百部。

鱼菜共生养殖模式对锦鲤生长、消化酶活力的影响及养殖推广效益测算

史东杰, 胡金有, 王赛赛, 陈晓璇, 朱华, 张欣

2019, 48(10): 155-161. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.023

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为了鱼菜共生养殖模式的进一步推广与广泛应用，降低传统养鱼模式对环境造成的影响，进行了鱼菜共生模式与传统养殖模式的比较研究。通过测定增重率、特定生长率、成活率、肠蛋白酶活力、肠脂肪酶活力和肠淀粉酶活力等指标，研究鱼菜共生养殖模式对锦鲤生长、消化酶活力的影响。结果表明，不同空心菜生物浮床覆盖面积（5%、10%、20%、40%）对锦鲤增重率、特定生长率、肠蛋白酶活力、肠脂肪酶活力和肠淀粉酶活力等均有促进作用。10%的空心菜生物浮床覆盖面积可有效加快锦鲤的生长速度，并对其消化酶活力具有显著促进作用，适合进行中试。从经济效益各项指标来看，该模式在经济效益计算5 a期内，已获经济效益为1 056.14万元，预测未来产生的经济效益为1 859.64万元，可实现年经济效益583.22万元，应用该模式平均1元研制费用，在模式应用于养殖生产后平均每年将为社会新增加纯收益4.17元，经济效益显著。

向日葵花盘直径及面积的测量

张卫正, 殷长魁, 金保华, 张伟伟, 刘岩, 陈启强, 蒋珂珂

2019, 48(10): 162-173. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.024

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对向日葵花盘的直径及面积进行测量，为花卉表型特征、传粉媒介相互作用、产量估计等后续研究提供参数和依据。通过特制的背景板和遮挡板在现场非破坏性地采集向日葵的花盘图像，自动进行图像的投影变换；查找花盘轮廓上的尖端点，采用尖端包裹法测量向日葵花盘多个不同径向的直径，确立向日葵花盘的平均直径；通过纹理分割、形态学的开运算和闭运算等操作，确立向日葵圆盘的区域，并计算圆盘的平均直径。推荐向日葵花盘平均直径的最佳采样测量次数是32 次。建立对向日葵花盘和圆盘平均直径、面积的预测模型。结果表明，建立的向日葵花盘、圆盘的平均直径预测模型与实际测量值的决定系数分别达到0.991、0.999，建立的向日葵花盘尖端轮廓、原始轮廓所包围区域的面积预测模型的决定系数分别为0.942、0.935，尖端包裹法测量花盘直径及面积的准确率高，对尺度变化不敏感。

烤烟上部烟叶颜色参数与烘烤特性分析及其关系研究

孙阳, 李青山, 倪超, 谭效磊, 刘莉, 王传义, 徐秀红

2019, 48(10): 174-180. DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.10.025

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为明确烟叶颜色参数与烘烤特性的关系,对烤烟品种NC55和NC102上部叶正、背面颜色参数和烘烤特性随采收时间的变化规律进行研究，对烟叶颜色参数与变黄指数、变褐指数进行相关性分析和回归分析，基于烟叶颜色参数建立变黄指数、变褐指数回归模型，并对其进行检验。结果发现，随烟叶采收时间的推移，烤烟品种NC55和NC102烟叶正、背面的颜色参数L值（亮度值）、b值（黄度值）和C值（饱和度值）总体上呈不断增大的趋势；H°值（色相角值）则大体上呈不断减小的趋势；a值（红度值）呈先减小后增大的趋势；变黄指数呈增大趋势，变褐指数呈先减小后增大的趋势，存在某一阶段的烘烤特性好于其他阶段的现象。烟叶颜色参数与变黄指数、变褐指数呈极显著或显著相关，基于烟叶正面颜色参数建立的变黄指数、变褐指数回归模型预测结果较好，基于烟叶正面颜色参数建立的回归模型预测烘烤特性可行。

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