摘要： 为建立一种经济、可靠的猪瘟病毒（CSFV）血清抗体检测方法，采用间接ELISA（E0-ELISA）方法，以在大肠杆菌（Escherichia coli）中表达的重组蛋白E0为包被原，优化反应条件。结果显示，优化后的E0-ELISA在包被原1.0 μg/mL质量浓度下37 ℃包被1 h效果最佳，最佳封闭条件为5％脱脂奶粉溶液37 ℃作用2 h，待检血清以1∶100稀释后37 ℃作用60 min效果最佳，二抗以1∶5 000稀释后37 ℃孵育45 min效果最佳。当OD450<0.370时，判断为猪血清CSFV抗体阴性；批内和批间重复试验变异系数分别为1.99%~7.69%和2.16%~9.23%，表明该方法具有良好的稳定性；E0-ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)、猪细小病毒(PPV)阳性血清时结果均为阴性；当CSFV阳性血清稀释至1∶640时结果仍为阳性，表明该检测方法具有良好的敏感性；与IDEXX CSFV抗体检测试剂盒相比，E0-ELISA检测符合率为92.00%，敏感性为97.86%，特异性为78.33%。综上，成功建立一种经济、稳定、特异性好和敏感性高的CSFV血清抗体间接ELISA检测方法。
