河南农业科学 ›› 2019, Vol. 48 ›› Issue (5): 130-136.

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犬细小病毒河南株的分离鉴定及全基因组序列分析

唐 磊1,2,张 弛2,秦 亚1,孙浩杰1,张 楠1,张百惠1,蔡亚南1,魏战勇2   

  1. 1.吉林农业大学,吉林 长春 130118; 2.河南农业大学,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2018-11-01 出版日期:2019-05-15 发布日期:2019-05-15
  • 通讯作者: 蔡亚南(1980-),男,吉林长春人,副教授,博士,主要从事动物病毒学及寄生虫病学研究。E-mail:caiyanan0925@163.com 魏战勇(1975-),男,河南安阳人,教授,博士,主要从事病原生物学和分子病毒学研究。E-mail:weizhanyong@henau.edu.cn
  • 作者简介:唐 磊(1992-),男,安徽六安人,在读硕士研究生,研究方向:病毒分子生物学。E-mail:944941803@qq.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31772722);中国博士后科学基金面上项目(2014M561308)

  • Received:2018-11-01 Published:2019-05-15 Online:2019-05-15

摘要: 为了研究河南省当前犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)的流行情况,收集经CPV胶体金试纸检测阳性的病犬血便病料,对其处理后进行特异性PCR扩增,然后将粪便处理物经滤器过滤后接种于F81细胞,进行细胞盲传并观察细胞的病变情况,同时对病毒进行理化性质及血凝试验等检测,最后对病毒的全基因组进行测序。结果表明,该病毒经特异性PCR扩增初步鉴定为CPV,接种于F81细胞盲传2代后,出现明显细胞病变。全基因组测序显示,该病毒分离株基因组全长5 052 bp,其中包含U型发卡结构188 bp,Y型发卡结构120 bp。此外,其ORF1全长2 007 bp,能够编码非结构蛋白NS1,ORF2全长2 257 bp,能够编码结构蛋白VP1、VP2。经VP2氨基酸序列分析,鉴定其为New CPV-2b亚型,命名为CPV/HN1,该病毒分离株TCID50为10-4.85/0.1 mL,血凝效价为1∶256。与国内的17株参考毒株全基因组序列核苷酸同源性为96.4%~99.9%,其中与北京分离毒株同源性为99.9%。

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