烟草赤星病生防芽孢杆菌的筛选鉴定及其生长条件研究

河南农业科学 ›› 2019, Vol. 48 ›› Issue (1): 84-89.

烟草赤星病生防芽孢杆菌的筛选鉴定及其生长条件研究

宋莉莎¹，司世飞¹，龙友华^1，2，刘仁祥²，李忠^1，2

1.贵州大学农学院，贵州贵阳 550025； 2.贵州大学贵州省烟草品质研究重点实验室，贵州贵阳 550025

收稿日期:2018-09-07 出版日期:2019-01-15 发布日期:2019-01-15
通讯作者: 李忠（1971-），男，贵州瓮安人，教授，博士，主要从事植物病害防治的教学及科研工作。E-mail:zhongzhongligzu@163.com
作者简介:宋莉莎（1993-），女，贵州贵定人，在读硕士研究生，研究方向：植物病害综合治理。E-mail:645244726@qq.com
基金资助:
贵州省烟草公司项目（中烟黔科［2014］2号）；贵州省烟草品质遗传改良与生物转化科技创新人才团队建设项目（黔科合人才团队［2015］4011）

Received:2018-09-07 Published:2019-01-15 Online:2019-01-15

摘要/Abstract

摘要： 为获得对烟草赤星病有效的生防菌，通过平板对峙培养法和双层平板打孔法从贵州省瓮安县植烟土壤中筛选对烟草赤星病菌有较强拮抗作用的细菌；通过菌株形态、生理生化特征，结合16S rDNA及gyrA联合基因序列分析对筛选出的菌株进行鉴定；采用单因素试验对生防菌株的生长条件进行初步研究。结果表明，筛选出对赤星病菌有较强拮抗作用的生防菌株F11，其无菌发酵上清液对病原菌生长的抑菌带可达23.5 mm，根据菌株形态、生理生化特性、16S rDNA及gyrA联合基因序列分析，将生防菌F11鉴定为甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）。该菌株在10~45 ℃、pH值3.5~10.0条件下均能生长，对碳源、氮源利用较广泛，最适生长条件为：培养时间18 h，温度35 ℃，pH值6.0，葡萄糖作为碳源，蛋白胨作为氮源。菌株F11对烟草赤星病菌抑菌作用较强，具有应用于该病害生物防治的潜力。

宋莉莎，司世飞，龙友华，刘仁祥，李忠. 烟草赤星病生防芽孢杆菌的筛选鉴定及其生长条件研究[J]. 河南农业科学, 2019, 48(1): 84-89.

参考文献

参考文献:
［1］祖艳青.河南省烟草赤星病菌及内生链格孢的鉴定和遗传多样性研究［D］.郑州：河南农业大学，2013.

［2］许志刚.普通植物病理学［M］.北京：中国农业出版社，2003.

［3］李凯，袁鹤.植物病害生物防治概述［J］.山西农业科学，2012，40(7)：807-810.

［4］李晶，杨谦.生防枯草芽孢杆菌的研究进展［J］.安徽农业科学，2008，36(1)：106-111.

［5］孙冰冰，李伟，魏军，等.生防芽孢杆菌的研究进展［J］.天津农业科学，2015，21(12)：102-107.

［6］程亮，游春平，肖爱萍.拮抗细菌的研究进展［J］.江西农业大学学报，2003，25(5)：732-737.

［7］祝学海，李玉权，陶小买，等.贵州半夏块茎腐烂病拮抗细菌的筛选与鉴定［J］.微生物学通报，2017，44(2)：438-448.

［8］东秀珠，蔡妙英.常见细菌系统鉴定手册［M］.北京：科学出版社，2001.

［9］GORDON R E.芽孢杆菌属［M］.蔡妙英，译.北京：农业出版社，1983.

［10］徐爱玲，吴等等，宋志文，等.引物选择对污泥微生物多样性分析的影响［J］.环境科学，2013，34(9)：3620-3626.

［11］CHUN J，BAE K.Phylogenetic analysis of Bacillus subtilis and related taxa based on partial gyrA gene sequences［J］.Antonie van Leeuwenhoek，2000，78：123-127.

［12］SWOFFORD D L.PAUP：Phylogenetic analysis using parsimony，(*and other methods)，version 4.0b10［M］.Sunderland MA：Sinauer Associates，2002.

［13］万安琪,蒋继志,沙海天,等.拮抗细菌W-7的鉴定及其对致病疫霉的抑制作用［J］.河南农业科学,2017,46(2):55-59,82.

［14］徐滔明，罗志威，易子霆，等.拮抗微生物在防治烟草病害中的研究与应用［J］.江西农业学报，2016，28(1)：41-44.

［15］陈雪，万科，张传萍，等.烟草赤星病拮抗细菌的筛选、鉴定及机制初步研究［J］.生物学通报，2013，48(7)：51-54.

［16］MADHAIYAN M，POONGUZHALI S，KWON S W，et al. Bacillus methylotrophicussp. nov.，a methanolutilizing，plantgrowth promoting bacterium isolated from rice rhizosphere soil［J］.International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology，2010，60(10)：2490-2495.

［17］黄霄，陈波，周登博，等.菌株BM-24的分离鉴定及对香蕉枯萎病菌的抑菌活性［J］.植物保护学报，2013，40(2)：121-127.

［18］冯云利，奚家勤，马莉，等.烤烟品种NC297内生细菌中拮抗烟草黑胫病的生防菌筛选及种群组成分析［J］.云南大学学报（自然科学版），2011，33(4)：488-496.

［19］SHAN H Y，ZHAO M M，CHEN D X,et al.Biocontrol of rice blast by the phenaminom ethylacetic acid producer of Bacillus methylotrophicusBC79［J］. Crop Protection，2013，44(2)：29-37.

［20］吕倩，胡江春，王楠，等.南海深海甲基营养型芽孢杆菌SHB114抗真菌脂肽活性产物的研究［J］.中国生物防治学报，2014，30(1)：113-120.

［21］罗琼，叶小莉，郑冰雅，等.植物内生甲基营养型芽孢杆菌防治番茄枯萎病［J］.泉州师范学院学报，2017，35(6)：17-20.

［22］胡江春，王楠，潘华奇，等.海洋微生物抗菌脂肽及新生物农药研发［J］.微生物学杂志，2013，33(6)：1-5.

[1]	胡娴, 彭涛, 王逗, 侯海军, 秦红灵, 陈香碧, 陈春兰. 一种改良的旱地土壤微生物DNA提取方法[J]. 河南农业科学, 2020, 49(5): 75-80.
[2]	李梦露, 陈彦云, 夏皖豫. 不同肥料配比对马铃薯品质和产量的影响[J]. 河南农业科学, 2020, 49(1): 44-51.
[3]	李春牛, 李先民, 黄展文, 卢家仕, 卜朝阳. ⁶⁰Co-γ射线对茉莉花插穗的辐照效应研究[J]. 河南农业科学, 2020, 49(1): 118-122.
[4]	田书鑫，刘南南，王桂清. 对峙培养法在生防菌抑制效果研究中的应用[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 1-6.
[5]	彭涛，尹国红，成东梅，于金林，赵伟峰，高燕，田纪春，邓志英. 小麦冬前最大分蘖期根数的QTL定位[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 27-33.
[6]	吕赟，丘日光，杨仕梅，吴佳海，宋莉. 百脉根PIN基因家族的鉴定与分析[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 39-48.
[7]	毛家伟，马聪，唐培培，张翔，徐敏，何雷，李亮，司贤宗，索炎炎，吴俊林. 耕作模式对烤烟根系生长和烟叶钾、氯含量的影响[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 56-60.
[8]	曹力毅，毕江涛，肖国举. 3株嗜（耐）盐菌株不同组合对盐碱土壤不同粒径团聚体含量的影响[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 74-80.
[9]	袁素素，张玮玮，王财成，叶秀娟. 望江南种子SU5抗菌蛋白的纯化、抑菌机制及稳定性研究[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 81-87.
[10]	张振华，林江，王文雅，许畅，杨开样，何世伟. 火龙果溃疡病原菌拮抗菌株的筛选与生物防治效果初探[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 88-94.
[11]	苏旺苍，郝红丹，徐洪乐，孙兰兰，吴仁海. 10种助剂对玉米田除草剂烟·硝·莠的增效作用及其安全性研究[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 95-101.
[12]	张凯月，贺春玲，陈玲玲，韩懂博，侯小改. 地熊蜂在油用牡丹凤丹上的传粉生态学研究[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 102-109.
[13]	李鸽，刘肖，李青梅，杨艳艳，王彦红，张改平. 猪流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 129-133.
[14]	张浩，王宏博，马武，贾聪俊，马晓明，吴晓云，褚敏，阎萍，成述儒，梁春. 无角牦牛Hesx1基因多态性及其与生长性状的关联分析[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 134-139.
[15]	牛树辉，陈梦飞，吕帅飞，李声平，杨红飞，高小蝉. 大鲵希瓦氏菌的分离鉴定及其病理学观察[J]. 河南农业科学, 2019, 48(8): 147-153.