摘要： 为了研究肌肉生长抑制素（MSTN）的相关功能，应用分子生物学方法构建敲除MSTN的AAV-SaCas9载体，通过转染293T细胞提取基因组后进行T7酶切鉴定、TA克隆及测序确定该基因的敲除效果；将鉴定正确的AAV-SaCas9重组质粒与pHelper质粒共转染AAV-293细胞3 d后，分离纯化病毒并用实时荧光定量PCR法检测病毒滴度。结果显示，成功构建了敲除MSTN基因的AAV-SaCas9重组载体，T7酶切和测序鉴定出sgRNA2位点可以对MSTN进行编辑，并成功将其包装成病毒，经荧光定量PCR鉴定病毒滴度为2.73×1012 vg/mL。
