河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (9): 156-160.

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BCA-TCA法快速测定烟草蛋白质的研究

翟羽晨1,王万能1*,项钢燎1,张潇骏1,刘 钦1,唐晓莲1,戴 亚2,马扩彦2,谭兰兰3   

  1. 1.重庆理工大学 药学与生物工程学院,重庆 400054; 2.重庆中烟工业有限责任公司,重庆 400060; 3.四川中烟工业有限责任公司,四川 成都 610000
  • 收稿日期:2017-05-31 出版日期:2017-09-15 发布日期:2017-09-15
  • 通讯作者: 王万能(1971-),男,四川开江人,教授,博士,主要从事生物工程方面的研究。E-mail:wannengw@cqut.edu.cn
  • 作者简介:翟羽晨(1994-),男,山西临汾人,本科,主要从事分析检测方面的研究。E-mail:648411151@qq.com
  • 基金资助:
    川渝中烟工业有限责任公司科技项目(2014Q116)

  • Received:2017-05-31 Published:2017-09-15 Online:2017-09-15

摘要: 为快速准确地测定烟草中的蛋白质含量,建立并优化了BCA-TCA法,即提取烟叶蛋白质的最佳体系条件为pH值7.0的0.05 mol/L PBS缓冲液、液料比40 mL/g,使用TCA沉淀蛋白质,利用差减法去除烟叶中还原性物质对BCA方法准确性的影响,从而准确测定样品的蛋白质含量。结果表明:该方法测得的烟叶样品蛋白质含量变异系数小于5%,重复性较好;样品的加标回收率为96.39%,加标回收变异系数为0.75%<2%,准确度高;BCA-TCA法和克达尔法测定值的t检验结果为t=1.554 5<t0.05,8=2.306,说明2种方法在95%的置信区间内无显著差异,但建立的BCA-TCA法将耗时缩短至2.5~3.5 h,且操作步骤简捷、所用设备简单。可见,建立的BCA-TCA法能够快速准确地测定烟草中的蛋白质含量。

关键词:  , 烟草; 蛋白质; BCA-TCA法; 测定