摘要： 建立关于花吊丝竹的ISSR-PCR反应体系，为花吊丝竹种质资源鉴定提供理论基础。采用单因素试验法，对影响PCR扩增效果的Mg2+浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物浓度及模板DNA用量等5个PCR反应体系主要成分以及退火温度和循环次数进行分析，并利用建立的优化反应体系和扩增程序对100条候选引物进行筛选。结果表明，适合花吊丝竹的ISSR-PCR反应体系为：20 μL的反应液中含3.0 mmol/L Mg2+、0.20 mmol/L dNTPs、1.25 U Taq DNA聚合酶、0.6 μmol/L 引物、10 ng模板DNA、2 μL 10×Buffer、8.55 μL ddH2O。扩增程序为：94 ℃预变性5 min；94 ℃变性45 s，52.7 ℃退火30 s，72 ℃延伸90 s，40个循环；72 ℃延伸10 min，4 ℃保存。建立的花吊丝竹的ISSR-PCR反应体系能够扩增出清晰、多态性较高的条带，且筛选出的16条引物具有高度多态性。表明该体系具有较高的稳定性、重现性和适用性。
