河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (4): 80-83,94.

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烟草青枯菌Tn5突变体库的构建及突变位点分析

李小杰,李淑君*,李成军,陈玉国,王海涛,邱 睿,胡亚静   

  1. 河南省农业科学院 烟草研究所,河南 许昌 461000
  • 收稿日期:2016-11-01 出版日期:2017-04-15 发布日期:2017-04-15
  • 通讯作者: 李淑君(1966-),女,河南焦作人,研究员,硕士,主要从事烟草植保研究及技术推广工作。E-mail:13603749396@126.com
  • 作者简介:李小杰(1983-),女,河南许昌人,助理研究员,博士,主要从事烟草病理研究。E-mail:lixiaojie000631@sina.com
  • 基金资助:
    河南省基础与前沿技术研究计划项目(152300410142);河南省烟草公司科技项目(HYKJ201407)

  • Received:2016-11-01 Published:2017-04-15 Online:2017-04-15

摘要: 为了从烟草青枯菌全基因组范围内发掘致病性相关基因,采用电转化法构建了一个Ez-Tn5转座子介导的烟草青枯菌TXLLJ14-3菌株插入突变体库,该突变体库包含1.2万个突变子,经烟草上的致病性检测,共得到216个无致病力或弱致病力突变菌株。利用TAIL-PCR扩增获得其中15个无致病力烟草青枯菌的Tn5侧翼序列,并对其插入位点进行了分析,结果表明,15个突变菌株的插入位点分别位于核苷酸水解酶、糖基转移酶、转座酶和合成酶等具有不同功能的基因上,这些基因受到干扰或破坏后,可能会抑制致病相关物质的表达或分泌,或者诱导烟草对病原菌产生抗性,从而表现出无致病力特征。

关键词:  , 烟草青枯菌, Tn5插入突变, 无致病力菌株, TAIL-PCR, 突变位点