河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (3): 122-128.

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河南地区NADC30-like PRRSV毒株的增值特性与遗传进化分析

王林建1,2,郭振华2,乔松林2,陈鑫鑫2*,张改平1,2*
  

  1. 1.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 450002; 2.河南省农业科学院 河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点开放实验室,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2016-09-16 出版日期:2017-03-15 发布日期:2017-03-15
  • 通讯作者: 陈鑫鑫(1987-),女,河南兰考人,助理研究员,博士,主要从事动物病毒疫病免疫机制研究。E-mail:summerr_2016@163.com张改平(1960-),男,河南内黄人,研究员,博士,主要从事动物免疫学及疫病快速检测技术研究。E-mail:zhanggaiping2003@163.com
  • 作者简介:王林建(1991-),男,河南新乡人,在读硕士研究生,研究方向:分子病原学和免疫学。E-mail:wljgnn@126.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金重大项目(31490601);现代农业(生猪)产业技术体系专项基金项目(CARS-36);河南省现代农业(生猪)产业技术体系项目(S2012-06)

    

  • Received:2016-09-16 Published:2017-03-15 Online:2017-03-15

摘要: 为研究河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特点和遗传变异情况,采集河南省滑县地区猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场中的病料,经研磨、稀释、离心处理后将悬液上清接种于原代猪肺泡巨噬细胞,进行病毒分离培养,结果显示,PAM出现典型细胞病变效应,将得到的分离株命名为HNhx。应用PRRSV N蛋白的特异抗体进行间接免疫荧光(IFA)试验,结果表明,接种HNhx分离株的PAM出现特异性荧光,证明该分离株为PRRSV。应用RT-PCR技术对Nsp2区进行扩增分析,根据扩增目的产物大小推测HNhx分离株为NADC30-like毒株。遗传分析发现,与其他参考毒株相比,HNhx毒株的ORF3、ORF4和ORF5基因与NADC30毒株的同源性最高。基于ORF3、ORF4和ORF5序列构建进化树,系统进化分析的结果表明,HNhx归于NADC30-like亚群。

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒, 分离, 鉴定, 序列分析