鸡新城疫病毒中和单克隆抗体的制备及鉴定

河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (1): 127-131.

鸡新城疫病毒中和单克隆抗体的制备及鉴定

李青梅¹，王丽¹，冯丽丽²，张雨杭³，赵东¹，杨艳艳¹，邢广旭¹，柴书军¹，李赛赛¹，张丽萍¹，郭军庆^1*，张改平^1,3,4*

1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002；2.河南省农业科学院农业经济与信息研究所，河南郑州 450002；3.河南农业大学牧医工程学院，河南郑州 450002；4.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州 225009

收稿日期:2016-09-20 出版日期:2017-01-15 发布日期:2017-01-15
通讯作者: 张改平（1960-），男，河南内黄人，研究员，博士，主要从事动物免疫学研究。E-mail:zhanggaiping2003@163.com 郭军庆（1970-），男，河南林州人，研究员，博士，主要从事动物免疫学研究。E-mail:13838248132@163.com
作者简介:李青梅（1972-），女，河南郑州人，副研究员，主要从事快速检测技术研究。E-mail:350164155@qq.com
基金资助:
国家重点研发计划项目（2016YFD0500800）；公益性行业（农业）科研专项（201303033）；河南省科技攻关项目（162102110051）

Received:2016-09-20 Published:2017-01-15 Online:2017-01-15

摘要/Abstract

摘要： 采用差速离心法纯化鸡新城疫病毒（NDV）标准毒株F48E8，免疫Balb/c小鼠，应用杂交瘤细胞技术制备抗NDV单克隆抗体，旨在为NDV中和抗原表位分析奠定基础。将NDV感染BHK-21细胞，建立异源免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)的单克隆抗体检测方法，筛选获得14株分泌抗NDV单克隆抗体杂交瘤细胞株，其单克隆抗体腹水IPMA效价均在0.50×10^-2~2.56×10^-5（F48E8株和LaSota株）。血凝抑制试验（HI）结果表明，单克隆抗体1G6、2C1、4D2、5F2和13A5具有血凝抑制活性，其HI效价在（6~12）log2（F48E8株）和（9~11）log2（LaSota株）。病毒中和试验结果表明，单克隆抗体5F2和13A5对F48E8株和LaSota株均有明显的病毒中和活性，中和效价分别为1∶400~1∶800和1∶25。夹心ELISA结果表明，单克隆抗体5F2识别NDV HN蛋白，13A5识别F蛋白。综上，成功制备了具有中和活性的NDV单克隆抗体（5F2和13A5）。

关键词: , 鸡新城疫病毒, 单克隆抗体, 免疫过氧化物酶单层细胞试验, 血凝抑制试验, 中和试验, 中和活性

李青梅，王丽，冯丽丽，张雨杭，赵东，杨艳艳，邢广旭，柴书军，李赛赛，张丽萍，郭军庆，张改平. 鸡新城疫病毒中和单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 河南农业科学, 2017, 46(1): 127-131.

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