河南农业科学 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (3): 141-143,160.

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鸭瘟病毒UL6基因的原核表达及多克隆抗体的制备

吴 双1,马丽丽2,朱善元1,陆 辉1*   

  1. 1.江苏农牧科技职业学院,江苏 泰州 225300; 2.甘肃农业大学 动物医学院,甘肃 兰州 730070
  • 收稿日期:2015-09-22 出版日期:2016-03-15 发布日期:2016-03-15
  • 通讯作者: 陆 辉 (1975-),男,江苏海门人,副教授,硕士,主要从事生物工程技术研究。E-mail:smluhui@163.com
  • 作者简介:吴 双(1983-),女,江苏徐州人,副教授,博士,主要从事动物传染病防控和流行病学研究。 E-mail:jswushuang@sina.cn
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31440083) ;江苏省科技支撑计划——农业部分项目(BE2012366)

  • Received:2015-09-22 Published:2016-03-15 Online:2016-03-15

摘要: 为制备鼠抗鸭瘟病毒(DPV)UL6基因的多克隆抗体,采用PCR方法扩增出UL6基因,连接原核表达载体pET-32a(+),构建表达质粒pET-UL6,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3),于37 ℃经1.0 mmol/L的IPTG诱导4 h,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况,将目的蛋白免疫Balb/c 小鼠,利用ELISA方法检测特异性抗体效价。结果显示,构建的原核表达质粒经IPTG诱导能正确表达,且表达的重组蛋白能与DPV阳性血清反应,制备的多克隆抗体效价可达1∶16 000。表明,制备的多克隆抗体具有良好的免疫原性,可以用于UL6基因的表达检测。

关键词: 鸭瘟病毒, UL6基因, 原核表达, 多克隆抗体