河南农业科学 ›› 2010, Vol. 39 ›› Issue (8): 122-125.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.08.033

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重组H5N1亚型禽流感病毒NA基因腺病毒的滴度测定及遗传稳定性研究

胡建和1;王青1;徐彦召2;郑素玲1;吴玉苹1;杭柏林1   

  1. 1河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;2中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
  • 出版日期:2010-08-15 发布日期:2010-08-15
  • 基金资助:
    河南省高校杰出科研人才创新工程项目(2006KYCX020)

  • Published:2010-08-15 Online:2010-08-15

摘要: 为了研究表达H5N1亚型禽流感病毒NA基因重组腺病毒pAd-N1的遗传稳定性及重组病毒的滴度,将重组腺病毒pAd-N1在293细胞上连续传代20次,取第5、10、15、20代的重组病毒,采用PCR方法扩增禽流感病毒NA基因,并进行基因序列分析;用绿色荧光蛋白做标记计算出20代次时重组病毒的滴度。结果显示:从各代重组病毒DNA中均扩增出了约1 400 bp的目的条带,序列分析结果表明,第5、10、15代重组病毒中的NA基因序列与原始转移载体序列完全一致,第20代重组病毒插入基因有2处发生了点突变(516位A→G,1 323位T→C),但其编码的氨基酸未发生变化,即蛋白抗原表位未发生变化;采用快速测定法计算出重组腺病毒的滴度为109.5pfu/mL。

关键词: 禽流感, 重组腺病毒, 遗传稳定性, 病毒滴度

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