H5N1禽流感病毒HA基因的重组腺病毒表达载体的构建

doi:10.3969/j.issn.1004-3268.2010.07.027

河南农业科学 ›› 2010, Vol. 39 ›› Issue (7): 92-96.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.07.027

H5N1禽流感病毒HA基因的重组腺病毒表达载体的构建

王青¹;胡建和¹;徐彦召²;朱国坡¹;郑素玲¹

¹河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;²中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241

出版日期:2010-07-15 发布日期:2010-07-15
基金资助:
基金项目：河南省高校杰出科研人才创新工程项目（2006KYCX020）

Published:2010-07-15 Online:2010-07-15

摘要/Abstract

摘要： 采用PCR方法扩增出禽流感病毒HA基因,将其定向插入pAdtrack-CMV腺病毒穿梭质粒中构建pAdtrack-H5,之后将pAdtrack-H5与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在基因工程菌BJ5183中进行同源重组,获得腺病毒质粒pAdeasy-H5,将pAdeasyd-H5经PacⅠ线性化后转染HEK293细胞株,包装出含有HA基因的腺病毒pAd-H5。结果表明：含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-H5和含有目的基因的腺病毒质粒pAdeasy-H5经PCR、双酶切及核苷酸测序鉴定无误。包装成功的腺病毒pAd-H5经绿色荧光蛋白和RT-PCR分析证实,目的基因在该细胞中成功表达。

关键词: 腺病毒载体, 禽流感病毒, H5N1亚型, HA基因, 载体构建

中图分类号:

S852.65

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