河南农业科学 ›› 2007, Vol. 36 ›› Issue (12): 116-119.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2007.12.035

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His6免疫原的制备及免疫小鼠抗体效价检测

朱彦彩1,2;王选年1,2;银梅2;乔新安1;吴艳云1,2;熊静2   

  1. 1河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;2河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003
  • 出版日期:2007-12-15 发布日期:2007-12-15

  • Published:2007-12-15 Online:2007-12-15

摘要: 采用EDC-步法将His6多肽分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备两种人工结合抗原KLH—His6和BSA—His6。将制备的KLH-His6作为免疫原,皮下分5点注射免疫6只健康6周龄雌性Balb/c小鼠;首次免疫取KLH-His6(50μg/只)与氟氏完全佐剂(FCA)充分乳化,每只免疫200肚L,以后每间隔两周,同法进行第2,3次免疫,用氟氏不完全佐荆(FIA)乳化。每次免疫8d后尾部采血,以BSA—His6为包被抗原检测抗His6抗体。结果表明,成功制备了His6免疫原,并免疫了小鼠;间接ELISA检测不同时期小鼠抗体效价最高达到1:8000,免疫小鼠的抗体效价水平整体呈上升趋势,为His6单隆抗体的制备奠定了基础。

关键词: His6多肽, 免疫原制备, 间接ELISA, 抗体效价

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