河南农业科学 ›› 2009, Vol. 38 ›› Issue (3): 99-102.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2009.03.029

• • 上一篇    下一篇

伪狂犬病病毒Ea株ORF-1基因在BHK-21细胞上的表达

徐引弟1,2;陈焕春2;肖少波2   

  1. 1河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南郑州450002;2华中农业大学农业微生物国家重点实验室,湖北武汉430070
  • 出版日期:2009-03-15 发布日期:2009-03-15
  • 基金资助:
    河南省科技攻关项目(072102140004)

  • Published:2009-03-15 Online:2009-03-15

摘要: 以伪狂犬病毒Ea株BamHI5’片段为模板,PCR扩增出约0.6kbORF-1基因完整编码区序列,将该基因克隆到pBluescriptⅡSK^+中,构建重组载体pSKORF1。进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强型绿荧光蛋白EGFP下游,构建真核表达载体pEGFPORF1,脂质体法转染BHK-21细胞,G418加压筛选至正常细胞完全死亡。在倒置荧光显微镜下观察,可见pEGFPORF1转染的细胞在细胞膜和细胞浆中发出较强的荧光,证明ORF-1基因在BHK-21细胞中获得了表达。

关键词: 伪狂犬病病毒, ORF-1基因, 克隆, 表达

中图分类号: