河南农业科学 ›› 2009, Vol. 38 ›› Issue (1): 94-97.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2009.01.027

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牡丹ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

施江;高双成;孔祥生;刘素云;郭永新;陈春燕;郁飞燕   

  1. 河南科技大学农学院,河南洛阳471003
  • 出版日期:2009-01-15 发布日期:2009-01-15
  • 基金资助:
    河南科技大学校基金;河南科技大学SRTP项目;洛阳市科技计划项目(0602042A)

  • Published:2009-01-15 Online:2009-01-15

摘要: 利用CTAB改良法提取牡丹洛阳红花辩总RNA,通过反转录酶和设计的ACC氧化酶基因特异引物合成709bp目的片段,进行测序和比对,以确定目的片段的正确性。在709bpACC氧化酶基因片段和pBI121植物表达载体上选择合适的酶切位点,进行XbaI和SmaI双酶切。将709bp片段上切下的510bp片段反向插入pBI121植物表达载体35S启动子后面,构建成含510bp牡丹ACC氧化酶基因反义表达载体。最后采用电击法转化进感受态农杆菌GV3101,以备用于花粉管通道法转化牡丹。

关键词: 牡丹, ACC氧化酶, 克隆, 反义表达载体

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