河南农业科学 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (1): 119-123.

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猪伪狂犬病毒gB和gC蛋白B细胞表位编码序列的融合表达及活性测定

张 冲1,2,刘 芳1,赵 东2,邓瑞广2,张改平2,3,李学伍2*   

  1. 1.河南科技大学 动物科学技术学院,河南 洛阳 471003; 2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002; 3.河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2015-07-10 出版日期:2016-01-15 发布日期:2016-01-15
  • 通讯作者: 李学伍(1964-),男,河南通许人,研究员,博士,主要从事动物病原学和免疫学研究。E-mail:lixuewu2002@126.com
  • 作者简介:张 冲(1989-),男,河南新乡人,在读硕士研究生,研究方向:分子病原学和免疫学。E-mail:421986388@qq.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31172348)

  • Received:2015-07-10 Published:2016-01-15 Online:2016-01-15

摘要:  依据猪伪狂犬病毒gB和gC蛋白的B细胞表位编码序列,分别设计gB和gC蛋白B细胞表位编码序列的融合扩增引物,利用融合PCR技术,将gB和gC蛋白B细胞表位编码序列有机地融合为gB-C表位编码序列。将融合基因片段插入到原核表达载体pET28a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),1.0 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白gB-C能够高效表达,重组蛋白的分子质量约为38 ku;经Western blot鉴定分析,小鼠抗His标签单克隆抗体和PRV阳性血清均能识别表达的重组蛋白。表明成功表达了融合蛋白gB-C,且表达的重组蛋白具有较好的免疫学活性。

关键词: 猪伪狂犬病毒, gB蛋白, gC蛋白, B细胞表位, 融合表达