河南农业科学 ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (10): 146-148.

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对虾病毒DNA/RNA的实时荧光定量RT-PCR同步检测方法研究

沈飚1,王忠发2,胡兴娟1,顾松叶2   

  1. 1.舟山出入境检验检疫局,浙江 舟山 316000;2.舟山市疾病预防控制中心,浙江 舟山 316021
  • 收稿日期:2013-04-26 出版日期:2013-10-15 发布日期:2013-10-15
  • 作者简介:沈飚(1967-),男,浙江舟山人,高级工程师,本科,主要从事食品安全方面的研究。E-mail:sb@zs.ziq.gov.cn

  • Received:2013-04-26 Published:2013-10-15 Online:2013-10-15

摘要: 为建立同步检测对虾DNA/RNA病毒的实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)方法,提高检验检疫工作效率,探索了一种新的实时荧光定量PCR扩增反应程序。结果显示,应用优化的实时荧光定量RT-PCR检测4种对虾病毒(白斑综合症病毒、传染性皮下及造血器官坏死病毒,桃拉综合征病毒、黄头病毒)DNA/RNA,扩增曲线形态典型,扩增效率理想(E值分别为1.06、1.07、0.92、0.92),标准曲线线性良好(r=1),重复性一致(标准差0.05~0.46,变异系数0.26%~1.62%),灵敏度高,且与实时荧光定量PCR相比差异不显著(平均Ct值误差0.04~0.40,t值0.53~2.50,P>0.05),检测时间约1h。优化的荧光定量RT-PCR可以用于4种对虾病毒DNA/RNA的快速定量检测。 

关键词: 荧光定量RT-PCR, 对虾病毒, 同步扩增DNA/RNA