河南农业科学 ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (10): 142-145.

• 畜牧 兽医 • 上一篇    下一篇

绿色荧光蛋白基因在山羊胎儿成纤维细胞中的表达

楚秋霞1,王二耀1*,吴姣2,陈付英1,王治方1,辛晓玲1,施巧婷1,冯亚杰1,李文军1,魏成斌1,徐照学1   

  1. 1.河南省农业科学院 畜牧兽医研究所,河南 郑州 450002;2.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2013-06-08 出版日期:2013-10-15 发布日期:2013-10-15
  • 通讯作者: 王二耀(1971-),男,内蒙古呼和浩特人,副研究员,博士,主要从事家畜胚胎工程研究。E-mail:eryaowang@yahoo.com
  • 作者简介:楚秋霞(1984-),女,河南许昌人,助理研究员,硕士,主要从事家畜胚胎工程研究。E-mail:chuqiuxia@163.com
  • 基金资助:
    河南省农业科学院基础研究专项资金项目;国家转基因肉羊新品种培育专项(2013ZX08008003-002)

  • Received:2013-06-08 Published:2013-10-15 Online:2013-10-15

摘要: 为建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的山羊胎儿成纤维细胞(gFFC)株,采用组织块贴壁法培养gFFC,QIAGEN转染试剂介导转染gFFC,用G418梯度法筛选阳性细胞株。结果显示:培养的gFFC生长形态正常;24孔培养板中细胞汇合度达70%~80%时,每60μL转染液内含DNA量0.4μg和QIAGEN转染试剂3μL,每孔内加入40μL转染液时能获得最佳转染效果,在G418筛选1个月后获得抗性阳性细胞株。表明EGFP基因在gFFC中成功表达。 

关键词: 山羊胎儿成纤维细胞, 转染, EGFP基因, 表达