河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (10): 127-130.

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海产品中霍乱弧菌实时浊度LAMP 检测方法的建立

胡兴娟1,沈 飚1,江玲丽1,王莲芳2,滕 跃1,朱竹君1   

  1. 1.舟山出入境检验检疫局, 浙江 舟山 316000;2.德清县食品药品检验所,浙江 德清 313200
  • 收稿日期:2014-05-16 出版日期:2014-10-15 发布日期:2014-10-15
  • 作者简介:胡兴娟(1981-),女,浙江绍兴人,工程师,硕士,主要从事微生物检测方面的研究。E-mail:shxhxj@aliyun.com
  • 基金资助:
     
    浙江检验检疫局科技计划项目(ZK201337)

  • Received:2014-05-16 Published:2014-10-15 Online:2014-10-15

摘要: 为建立一种快速、敏感、特异、有效的检测霍乱弧菌方法,以有效预防及控制霍乱弧菌感染,针对霍乱弧菌ctxA基因的保守区域设计引物,应用实时浊度仪进行环介导等温扩增(LAMP),研究其特异性与灵敏性,并利用该体系检测海产品中的霍乱弧菌。结果显示,含ctxA基因的霍乱弧菌可得到特异性扩增,而其他与霍乱弧菌(含ctxA基因)共存于海产品中的7种细菌均未得到扩增,DNA检测下限为81fg/μL。用建立的实时浊度LAMP检测方法对150份海产品进行检测,检出含霍乱弧菌的海产品2份,与荧光定量PCR结果一致。表明建立的LAMP检测方法可用于海产品中霍乱弧菌的检测。 

关键词: 霍乱弧菌, 环介导等温扩增, 实时浊度, ctxA基因, 检测方法