乙脑病毒猪源分离株CSF.XZ-2D感染BHK-21细胞毒的浓缩及纯化

河南农业科学 ›› 2015, Vol. 44 ›› Issue (12): 117-120，139.

乙脑病毒猪源分离株CSF.XZ-2D感染BHK-21细胞毒的浓缩及纯化

滕蔓¹，冯丽丽²，罗俊¹，樊剑鸣³，王方雨¹，郅玉宝¹，李秀杰¹，邓瑞广¹，张改平^1,4*

1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002； 2.河南省农业科学院农业经济与信息研究所，河南郑州 450002； 3.郑州大学公共卫生学院，河南郑州450001；4.河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002

收稿日期:2015-08-27 出版日期:2015-12-15 发布日期:2015-12-15
通讯作者: 张改平（1960-），男，河南内黄人，研究员，博士，主要从事动物免疫学及重大疫病快速检测技术研究。E-mail：zhanggaiping2003@163.com
作者简介:滕蔓（1977-），女，河南周口人，助理研究员，博士，主要从事动物疫病快速检测技术研究及产品研发。E-mail:tm135@aliyun.com
基金资助:
河南省农业科学院科研发展专项资金项目（20157817）；河南省科技攻关计划项目（152102110127）；河南省农业技术推广财政补助资金（YCN201519111）；国家自然科学基金项目（31372453）；国家公益性行业（农业）科研专项经费项目（201203082-5）

Received:2015-08-27 Published:2015-12-15 Online:2015-12-15

摘要/Abstract

摘要：

研究了日本流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）猪源分离株CSF.XZ-2D感染的BHK-21细胞培养物中JEV的浓缩及纯化方法，对浓缩及纯化后的病毒TCID₅₀效价分别进行测定。结果表明，经差速离心后病毒液在4 ℃条件下分别以30 000 r/min、40 000 r/min、50 000 r/min 、60 000 r/min超速离心3 h，其中50 000 r/min超速离心可将绝大部分JEV病毒粒子充分沉淀至离心管底部，浓缩效果最佳；病毒沉淀用PBS重悬后进行不连续蔗糖密度梯度离心，病毒粒子主要集中在35%~50%的区带蔗糖层。

关键词: 乙脑病毒, , BHK-21细胞, , 蔗糖密度梯度离心, , 浓缩, , 纯化

滕蔓，冯丽丽，罗俊，樊剑鸣，王方雨，郅玉宝，李秀杰，邓瑞广，张改平. 乙脑病毒猪源分离株CSF.XZ-2D感染BHK-21细胞毒的浓缩及纯化[J]. 河南农业科学, 2015, 44(12): 117-120，139.

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